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“我在莫纳什大学工作五年,在实验室建立的早期,购买了几台 SCIEX仪器;至近,我们在整个系统中增加了两套 TripleTOF6600系统和 QTRAP6500+系统。实验中每一台设备都能24小时运转。研究发现阶段的实验中,每台仪器每天要处理13份样品,每份样品通常运行90
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“我在莫纳什大学工作五年,在实验室建立的早期,购买了几台 SCIEX仪器;至近,我们在整个系统中增加了两套 TripleTOF6600系统和 QTRAP6500+系统。实验中每一台设备都能24小时运转。研究发现阶段的实验中,每台仪器每天要处理13份样品,每份样品通常运行90分钟的纳流梯度。能处理各种样品,包括培养的细胞、组织活检标本、体液和组织。研究发现阶段对于理解疾病机制具有重要意义,可以保证我们所检测到的多肽都是与疾病相关且具有特异性的。该方法主要包括利用 TripleTOF获取高分辨率 MS/MS,进行发现阶段研究,转移至 QTRAP进行更敏感的靶向分析。MRM仍然是定量分析的黄金标准,在获取定量信息后,我常触发线性离子阱,采集全扫描的 MS/MS图谱,从而保证定量化合物的可信度。QTRAP是一种对低丰度肽的定量分析,它具有很好的灵敏度和重现性;使用该质谱平台后,我们把肽的检测限提高到了更高的数量级。”
”“我们是利用 SWATH采集技术分析的先驱之一,并已发表了一篇关于用多种紧密相关的人类白细胞抗原等位基因进行定量分析的1。SWATH方法非常有效,它能够定量分析超过3,000个肽段,即使是至好的 MRM试验也是如此。利用 SWATH技术,研究病原体相互作用,深入分析数据,查询含有至多成分的反应因子,或查毒或抗原表达物2。它帮助我们理解了许多病毒在阻碍早期反应时使用的小技巧。
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作为环境化学家,科罗拉多矿业学院土木学与环境工程系副 Christopher Higgins博士说:“作为环境化学家,我们一直致力于发现有重要意义的新化合物,无论是在饮用水、雨水还是生物群落。他说:“SWATH采集技术给了我们收集和存档数据的机会,这样我们就可以在不重新采集的情况下对旧数据进行检验。这在样本有限的环境监测工作中具有很大的优势”。
SCIEX可以为环境科学提供一系列研究流程,如新型未知物质筛选鉴定、环境污染物降解机制、环境代谢组学等,请参考以下应用案例。
实例一.的非靶向筛选流程,结合饮用水处理前后的高分辨率数据统计软件
用LC-QTOF技术筛选和鉴定饮用水处理过程中的原水和处理后的水中未知物质。采用的一针进样方式,对数据进行非相关数据采集(SWATH采集技术)模式。高解析度数据与统计软件(MarkerViewTM软件)相结合的非目标数据处理流程是未知物结构识别的关键。筛选未知化合物的方法是首先用统计学的方法确定有意义的化合物,然后再用谱库搜索不同的化合物。对样本未知的筛选包括缓蚀剂、人工甜味剂和。试验表明,经过处理的原水、处理水和深度处理水组成各不相同。
筛查实验采用了 SWATH采集技术,该技术能保证样品中所有可检测的化合物都被采集到二级谱图中。通过 SCIEX一体化的二级谱库和 NIST库进行筛选,可以筛选出更多的化合物,减少了手工鉴定所需的结构鉴定,提率。MarkerView软件可以用来确定不同样品中的特征物质。本软件中的统计工具可对各样本组之间的差异进行细致的分析,并能描述复杂的未知成分。
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色谱柱的使用与维护。
柱子是高i效液相色谱仪器中至主要的组成部分,被测物质是否能很好地分离和测定,色谱柱的性能起着决定作用。为了延长色谱柱的使用寿命,在日常工作中应特别注意色谱柱的正确使用和维护。
1、采用预柱和保护柱。在泵和进样器之间安装预柱(pre-column),它使色谱柱中的流动相达到了的平衡,并防止那些破坏柱填料的成分或污染物进入色谱柱。保护柱(guardcolumn)将那些能够被牢固地吸附在色谱柱上的成分阻挡在色谱柱中,并且保护柱应该与色谱柱中的填料相同。无需频繁更换色谱柱,即可频繁地更换预柱和保护柱,从而延长色谱柱的使用寿命。
2、阻止气体进入色谱柱。一些色谱柱(例如凝胶柱)不允许进入气泡,否则会使柱效降低甚至形成的难驱性气室。所以,为了防止气泡进入色谱柱,请确保使用已脱气的流动相,并严格按照以下步骤安装色谱柱。拆下色谱柱入口处的密封螺钉,观察是否有溶剂渗出; b.如果溶剂渗出,可以将色谱柱接在管道上,避免气泡进入; c.如果无溶剂渗出,则说明色谱柱的这一端已经进入空气,此时可以将色谱柱的出口端接到进样阀上,以反方向冲洗色谱柱,以便排除柱内的空气。对于色谱柱,至好采用0.2 ml/min的小流量,当溶剂流速过快或压力突然升高时,会导致柱性能下降; d.如果流出的溶剂中没有气泡,表明柱中的气体已被排出,再将色谱柱按正确的方向连接,所以气泡不能进入色谱柱。
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