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如何用制备色谱柱制备低含量的杂质？

制备色谱柱为ZorbaxSB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器，色谱仪为Agilent1100或LC-6A。想用其制备面积归一化法含量为0.05%左右的杂质，初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件，如，流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩，要求将95%以上的主峰切除。

（主峰后有二个杂质靠得很近。）

答：

1.制备用的流动相尽量等级高一点，否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。

2.使用馏分收集器时，延迟体积一定要计算准确，检测器的响应时间设到很小，否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比，如果4.6mm分析柱流速为1mL/min，9.4mm制备柱用1*（9.4/4.6）2,大约为4mL/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg，理论计算0.05%的杂质大约只有5μg，显然浓度太低，尽量是多做几次，合并馏分然后浓缩后做LC-MS分析。

色谱材料的不同

色谱材料的可选择性十分的广泛，因为需求的不同，标准化的色谱填料产品往往达不到所需的要求，因此根据需求进行定制化产品成为了一种常见的选择

通恒以诚信为首 ,服务至上为宗旨。公司专注生产销售工业制备色谱、超级制备色谱系统等产品,公司拥有强大的销售团队和经营理念。想要了解更多信息，赶快拨打网站上的热线电话！

制备色谱纯化中流速该如何设定

在制备纯化工艺中，想要准确、合理的确定流动相的流速范围，需要结合一定的理论基础和实际的纯化经验。为了使很多新接触制备纯化的用户能够更快、更好的对流速设定，三泰科技的Flash产品都向客户提供佳的流速范围，尤其是SepaBean machine液相制备色谱系统可智能推荐的流速参数，更快更便捷的处理常规的样品分离。但是对于非常规、比较难分离的样品就必须根据分离情况进行适当的流速调整才能成功达到分离要求。今天我们就从原理和纯化经验上探讨如何找到合适的流速，更好的分离那些让人的样品。

流动相

HPLC中使用的流动相是液体，而在气相色谱法中则是气体。由于液体的密度和粘度较高，因此要使用泵来给流动相推动压力通过HPLC色谱柱，因此液相色谱的背压通常很高，比如超高压液相色谱。背压太高会对液相系统造成负担，因此适当的控制在合适的压力程度，有助于我们分析测试的正常运行。恒谱生的液相色谱柱、保护柱、在线过滤器等都能做到低背压，死体积小，避免对分析结果造成影响。