结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:
净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净OD平均值/
人环磷酸腺苷 cAMP ELISA

结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度,Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算:
净OD平均值 = OD平均值 - NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比,计算公式 如下:
百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100
3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。

包被抗l体(或抗原)的选择:将抗l体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的较适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值较大而蛋白量较少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。
ELISA法是免l疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传l染病、寄生l虫病及非传l染病等方面的免l疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血l清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗l体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,
Ras活性分析。纯化的Ras蛋白分别用GDP (Lane 1)和GTPγS (Lane 2)进行活化。然后用特异性识别Ras活性构象的鼠单克l隆抗l体(Cat. # 26909)孵育。活性Ras珠子颗粒用特异性识别Ras活性构象的兔多克l隆抗l体(Cat # 21021)进行免l疫印迹实验。图展示的是Ras-GDP和Ras-GTPγS的Western blot实验结果。
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