一般生物组织中都含有一定的内源性过氧化物酶和碱性磷酸酶,在使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶检测系统进行免0疫组化染色时,内源性酶也会催化显色底物,产生非特异性着色。因此,在进行免0疫组化染色实验前将组织切片内源性的酶消耗掉是必要的。本品含有对内源性碱性磷酸酶的阻断成分,可避免由内源性碱性磷酸酶造成的非特异性背景染色,适用于细胞涂片、冰冻组织切片和石蜡包埋组织切片。1.在用 ALP 的
染色液
一般生物组织中都含有一定的内源性过氧化物酶和碱性磷酸酶,在使用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶检测系统进行免0疫组化染色时,内源性酶也会催化显色底物,产生非特异性着色。因此,在进行免0疫组化染色实验前将组织切片内源性的酶消耗掉是必要的。本品含有对内源性碱性磷酸酶的阻断成分,可避免由内源性碱性磷酸酶造成的非特异性背景染色,适用于细胞涂片、冰冻组织切片和石蜡包埋组织切片。

1.在用 ALP 的 IHC 中,内源性碱性磷酸酶常使靶抗原的特异性染色分辨不清。本品抑制细胞制片、冰冻组织切片和石蜡包埋切片中的内源性碱性磷酸酶。
2.冰冻组织切片和细胞制片如外周血、骨0髓和其它体液包含大量造血干细0胞。对于冰冻组织切片,建议用丙0酮固定。对于血细胞和骨0髓涂片,建议用丙0酮/甲0醇固定。
3.标本的染色依赖于染色前的组织处理。不恰当的固定、冷冻、融化、洗涤、干燥、加热和切片可能产生假阳性。假阳性结果也可能由坏死和变性的细胞产生的交叉反应。

1. 检测细胞或组织中是否含有内源性过氧化物酶的方法:将组织切片水化后,加入底物DAB,如果变为棕色,说明组织切片含有过氧化物酶,需要封闭内源性过氧化物酶活性。
2.检测细胞或组织中是否含有内源性碱性磷酸酶的方法:将组织切片水化后,加入底物BCIP/NBT,如果变为棕色,说明组织切片含有内源性碱性酶,需要封闭其活性。
3.影响过氧化物酶的分子有血红素蛋白如红细胞中的血红蛋白,肌肉细胞中的肌红蛋白,粒细胞和单核细胞中的细胞色素及肝0脏和shen脏之中的触媒。
本试剂盒不提供的试剂
1. 一抗
2. 洗涤液
3. 过氧化物酶底物
4. 去离子水或蒸馏水
5. 内源性过氧化物酶抑制0剂
6. 封固剂
7. 其它:显微镜、玻片、盖玻片、加样器、试管、湿盒
溶液配制
1. 1×洗涤缓冲液:将 10× 洗涤缓冲液用蒸馏水进行 10 倍稀释(例如 5 ml 浓缩洗液 + 45
ml 蒸馏水)
2. 0.3% H2O2 无水甲0醇: 加 0.3% H2O2 无水甲0醇于组织切片上,室温孵育 30min, 在洗
涤缓冲液中润洗 10~15min。

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