亲和柱介绍
目前,于黄曲霉毒素分离纯化的固相萃取产品有两类:
一是亲和柱(IAC)[sl,它是将特异性的AFT抗体与适当的固定相结合填柱而成,特异性强,灵敏度较高。
二是多功能净化柱(MFC)它是一种特殊的SPE柱,以极性、非极性及离子交换等儿类基团组成填充剂,可选择性吸附样液中的脂类、蛋白类等杂质,AFT不被吸附而直接通过,MFC的操作更为简便,不需要进行活
肝素亲和柱报价
亲和柱介绍
目前,于黄曲霉毒素分离纯化的固相萃取产品有两类:
一是亲和柱(IAC)[sl,它是将特异性的AFT抗体与适当的固定相结合填柱而成,特异性强,灵敏度较高。
二是多功能净化柱(MFC)它是一种特殊的SPE柱,以极性、非极性及离子交换等儿类基团组成填充剂,可选择性吸附样液中的脂类、蛋白类等杂质,AFT不被吸附而直接通过,MFC的操作更为简便,不需要进行活化、淋洗和洗脱操作只需直接上样,10秒钟内即可完成整个净化过程,净化效果理想。
亲和柱——亲和层析的原理
通常,在开始亲和层析前需要预行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基。
首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混合,随后将洗涤缓冲液倒入色谱柱中。洗涤缓冲液通过破坏非目标生物分子与固定相的较弱结合来去除非目标生物分子。目标生物分子对固定相具有较高的亲和力,因此能够保持与固定相的结合,而不会被洗涤缓冲液冲走。然后将洗脱缓冲液倒入含有剩余目标生物分子的色谱柱中。洗脱缓冲液比洗涤缓冲液,能够从更大程度上减弱靶生物分子与固定相之间的相互作用,从而洗脱靶生物分子。洗脱得到的溶液包含洗脱缓冲液和目标分子,称为洗脱液。
固定相一般是凝胶基质,常见的有琼脂糖。为了防止目标分子与配体结合过程中的空间干扰或重叠,首先将含有烃链的抑制连接到琼脂糖珠(固体支持物)上。这种具有烃链的抑制通常被称为琼脂糖珠和靶分子之间的间隔基。
亲和柱——亲和层析介绍
将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中,当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时,与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中。那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附,直接流出,从而与被分离的蛋白质分开,然后选用适当的洗脱液,改变结合条件将被结合的蛋白质洗脱下来,这种分离纯化蛋白质的方法称为亲和层析。利用共价连接有特异配体的层析介质分离蛋白质混合物中能特异结合配体的目的蛋白或其它分子的层析技术。
(作者: 来源:)