亲和柱产品列表2
真菌亲和柱
产品名称:IAC109 产品名称:桔青霉素亲和柱 规格:3ml,25支/盒 检测样品:粮食、辣椒、红曲制品等
产品名称:IAC111 产品名称:呕吐亲和柱 规格:1ml/3ml,25支/盒 检测样品:粮食、面粉、饲料、酒等
产品名称:IAC112
肝素亲和柱报价
亲和柱产品列表2
真菌亲和柱
产品名称:IAC109 产品名称:桔青霉素亲和柱 规格:3ml,25支/盒 检测样品:粮食、辣椒、红曲制品等
产品名称:IAC111 产品名称:呕吐亲和柱 规格:1ml/3ml,25支/盒 检测样品:粮食、面粉、饲料、酒等
产品名称:IAC112 产品名称:赭曲霉A亲和柱 规格:1ml/3ml,25支/盒 检测样品:谷物、花生、饲料、调味品、中药等
亲和柱净化步骤
注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!
----3mL柱管取出上方堵头,减去上堵头螺纹下突出部分,插回柱子上,另一端与20mL针筒固定后使用;将1mL柱管上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上(柱管内偶见有小气泡属正常现象,不影响亲和柱的使用);
----准确移取上述混匀滤液,注入针筒中,调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过亲和柱;
----用20mL 水冲洗柱子(对于饲料及玉米加工副产品等颜色较深的样液,先用10mL 0.1%吐温20-PBS清洗,再用10 mL 10%水冲洗柱子,之后用10mL水冲洗柱子。),流速1秒/滴,弃去流出液,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;
----准确加入1.5mL(色谱级)洗脱,流速自然重力,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液,进行相关测定。
亲和柱亲和层析的基本原理
亲和层析是一种吸附层析,抗原(或)和相应的(或抗原)发生特异性结合,而这种结合在一定的条件下又是可逆的。
所以将抗原(或)固相化后,就可以使存在液相中的相应(或抗原)选择性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分离提纯的目的。此法具有有效、、简便等优点。
亲和柱——亲和层析的原理
通常,在开始亲和层析前需要预行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基。
首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混合,随后将洗涤缓冲液倒入色谱柱中。洗涤缓冲液通过破坏非目标生物分子与固定相的较弱结合来去除非目标生物分子。目标生物分子对固定相具有较高的亲和力,因此能够保持与固定相的结合,而不会被洗涤缓冲液冲走。然后将洗脱缓冲液倒入含有剩余目标生物分子的色谱柱中。洗脱缓冲液比洗涤缓冲液,能够从更大程度上减弱靶生物分子与固定相之间的相互作用,从而洗脱靶生物分子。洗脱得到的溶液包含洗脱缓冲液和目标分子,称为洗脱液。
固定相一般是凝胶基质,常见的有琼脂糖。为了防止目标分子与配体结合过程中的空间干扰或重叠,首先将含有烃链的抑制连接到琼脂糖珠(固体支持物)上。这种具有烃链的抑制通常被称为琼脂糖珠和靶分子之间的间隔基。
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