农bacillus转化法
农bacillus包括引起植物冠瘿瘤的根癌农bacillus和引起发根病的发根农杆1菌。根癌农杆1菌和发根农bacillus有相似的遗传背景。在农bacillus介导的转化中,80%左右是由根癌农bacillus介导的,大约20%是由发根农bacillus介导的。这里主要介绍根癌农杆1菌介导的转化。
根癌农bacillusTi质
腺病毒滴度测定
农bacillus转化法
农bacillus包括引起植物冠瘿瘤的根癌农bacillus和引起发根病的发根农杆1菌。根癌农杆1菌和发根农bacillus有相似的遗传背景。在农bacillus介导的转化中,80%左右是由根癌农bacillus介导的,大约20%是由发根农bacillus介导的。这里主要介绍根癌农杆1菌介导的转化。
根癌农bacillusTi质粒上有一段转移DNA(T-DNA)和Vir区,在农bacillus侵染植物时,这段T-DNA可以插入到植物基因组中,使其携带的基因在植物中得以表达。Vir区共24个基因,它们表达的蛋白与T-DNA的加工和转移有关。
科学家在培养转0基因植物时,常用什么中的质粒作为载体?
(1)具有较小的分子量。经验表明,为了避免在DNA的纯化过程中发生链的断裂,克1隆载体的分子大小建议不要超过10Kb。pBR质粒这种小分子量的特点,不仅易于自身DNA的纯化,而且可容纳较大的外源DNA部分片段;
(2)具有两种抗1菌素抗性基因可供作转化子的选择记号,能指示载体或重组DNA分子是否进入宿主细胞以及外源DNA分子是否插入载体分子形成了重组子。标记基因往往可以赋予宿主细胞一种新的表型,这种转化细胞可明显地区别于非转化细胞。当我们把一个DNA部分片段插入到某一个标记基因内时,该基因就失去了相应的功能。当把这种重组DNA分子转到宿主细胞后,该基因原来赋予的表型也就消失了。要是仍保留了原来表型的转化细胞,细胞内含有的DNA分子一定不是重组子。很显然,既要指示外源DNA是否进入了宿主细胞,又要指示载体DNA分子中是否插入了外源DNA部分片段,那么这种载体必须至少具有两个标记基因。另外,pBR质粒载体还具较高的拷贝数,而且经过氯霉1素扩增之后,每个细胞中可积累1000~3000个拷贝,这就为重组体DNA的制备提供了极大的方便。
腺病毒感1染后可获得对同型的持久免1疫力
与绝大多数呼吸道感1染的病原相比,机体对腺病毒的再感1染能产生有效的免1疫。起保护作用的是体内产生的循环中和抗1体。正常的健康成人一般也具有多型的抗1体。约40%~60%的6~15岁的人具有1、2和5型中和抗1体,但3、4和7型抗1体很少。母亲的抗1体能保护婴儿免除严重的腺病毒呼吸道感1染。
腺病毒防治原则
腺病毒的甲醛灭活疫1苗已被用于某些人群的预防,而且将来有被用人二倍体细胞培养的减毒活疫1苗所替代的可能。但因腺病毒对动物具有致癌作用,人们对全病毒疫1苗的作用与安全性存有疑虑。此外加强游泳池和浴池水的消毒,可使水传播性结膜1炎爆发的危险性降至zui小,在作眼的检查时应严格无菌操作,对所用设备充分灭菌,也可控制流行性结膜1炎的发生。对腺病毒感1染的cure仍无有效medicine。
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