正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱
固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。
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正相固相萃取柱为什么要用非极性溶剂洗脱
固相萃取柱指的是高质的填料,如硅胶,三氧化二铝等,其对物质的吸附能力遵循“相似相容”的原理,也就是对极性大的物质吸附能力强。采用弱极性洗脱剂能够让被吸附的物质选择性的分开,如果采用极性大的溶剂,将导致被吸附的物质没有选择的的“洗脱”,失去了“萃取”的意义。其实固相萃取就是柱色谱分离,相对HPLC而言是一种粗分离技术。
固相萃取柱的影响因素
流速
流速的控制对SPE至关重要,流速过大将引起SPE柱的穿漏,流速太小则处理速度太慢。柱预处理过程中流速适中,保证溶液充分湿润吸附剂即可,上样和洗脱过程则要求流速尽量慢些,以使分析物尽量保留在柱内或达到完全洗脱,否则会导致分析物流失,影响回收率的大小。尤其离子交换过程,进行比较缓慢,应采用较低的流速(0.5~2.0 mL/min)。
固相萃取柱的使用步骤
步骤一:预处理萃取柱。
在萃取样品之前,为了湿润固相萃取柱填料,用一满管溶剂冲洗管子。反相类型硅胶和非极性吸附剂介质,通常用水溶性溶剂预处理,然后用水或缓冲溶液。湿润吸附剂表面和渗透键合烷,以允许水更有效地湿润硅胶表面。有时前预处理溶剂使用之前。这些溶剂通常是与洗脱溶剂一样,是用之消除固相萃取管上的杂质及其对分析物的干扰,也可能该杂质只溶于强洗脱溶剂。
步骤二:加入样品。
将样品装入萃取柱,此时,固相萃取小柱中的填料会吸附样品中所感兴趣的化合物或者样品中的杂质。这样,当样品流出时,所选择的化合物(包括杂质)被留在萃取柱上。
步骤三:冲洗填料。
用一种强得能洗脱杂质而又弱得能保留感兴趣的化合物的冲洗液来冲洗杂质。
步骤四:洗脱感兴趣的化合物。
用溶剂将被吸附在萃取柱上的化合物洗脱在溶液里。
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