细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLSAVING细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地
QuickFreezing-I
细胞冻存步骤
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中。
2. 根据培养细胞的密度和冻存管的大小确定所需冻存细胞数。
3. 将所需数目的细胞悬浮液置于离心管中,1000rmp,5分钟离心收集培养细胞沉淀,彻0底弃去离心管中的上清液。
4. 加入适量的CELLSAVING细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为5×105-1×107/ml。轻柔地混匀细胞,制成细胞混合液。
5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中,建议每管1ml或1.5ml。
6. 直接将分装好的细胞冻存管放入-80℃超低温冰箱中,可长期冷冻保存。
7. 如果想液氮中长期保存,需先放入-80℃冰箱至少时间,方可移至液氮罐中保存。
产品描述:
使用动物血0清常会遭遇许多问题,例如:病毒感0染、或是其他动物源的污染原。使用无血0清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血0清培养基可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定。
Biological Industries(BI)开发无血0清细胞冻存液,细胞冻存与复苏后,平均活细0胞回收比例超过80%。与含血0清冻存液比较,BI无血0清冻存液细胞存活率都有较佳的表,BI无血0清细胞冻存液也适用于动物血0清培养的细胞冻存。

从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释10~20倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。通用细胞冻存液(无血0清)主要由培养基、DMSO等组成,不含血0清,是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。

细胞复苏操作方法
2.1从液氮罐取出冻存细胞,立即放入37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中,融化。
2.2准备离心管,加入2倍冻存细胞体积的细胞培养基,待冻存管中细胞完全融化后,将冻存细胞悬液缓慢加入离心管中。
2.3 1200-1500rpm 5min离心,弃上清。
2.4加入适量新鲜培养基,使用移液管缓慢悬浮细胞,并将细胞转染细胞培养皿/瓶中,显微镜下观察细胞状态,放入细胞培养箱中培养。
2.5 24h后观察细胞状态,并更换新鲜细胞培养液。

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