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加A尾试剂盒信息推荐「多图」

DNA连接酶与DNA聚合酶的区别? 形成方式不同 DNA连接酶是在两个DNA部分片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA部分片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。 DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA1片段上,形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用,催化原来的dna进行复1制,然后将原来的dn
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DNA连接酶与DNA聚合酶的区别?




形成方式不同

DNA连接酶是在两个DNA部分片段之间形成磷酸二酯键,不是在单个核苷酸与DNA部分片段之间形成磷酸二酯键。DNA连接酶都不能催化两条游离的DNA链相连接。

DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的DNA1片段上,形成磷酸二酯键。dna聚合酶起到催化剂的作用,催化原来的dna进行复1制,然后将原来的dna和复1制以后的dna进行模板配对后,连接聚合在一起,就可以形成新的dna链。









T4 RNA Ligase主要用于RNA和RNA之间的连接,连接时需要5'磷酸基团和3'羟基的存在。不仅可以进行RNA分子间的连接,也可以进行RNA分子(zui短8个碱基)的环化连接。

T4 RNA Ligase可以用于RNA和单核苷酸之间的连接,单核苷酸必须为5'和3'均磷酸化的形式,此时常用于RNA的3'末端标记。

T4 RNA Ligase也可以用于DNA和RNA之间的连接。当DNA提供5'磷酸基团,RNA提供3'羟基时,连接效率较高;当DNA提供3'羟基,RNA提供5'磷酸基团时,连接效率非常低。

T4 RNA Ligase也可以用于DNA和DNA之间的连接,但连接效率非常低。主要用于DNA的环化连接,例如5' RACE中的cDNA环化。DNA和DNA之间的连接尽管可以进行,但比较困难。






T4 RNA连接酶

用途:用RNA 3'末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5' RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特定位点引入非天然氨基酸。

来源:由大肠杆1菌表达,表达基因的来源为T4嗜菌体。

活性定义:37℃30分钟内,催化1 nmol 5'-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。

活性检测条件:50mM Tris-HCl(pH7.5),10mM MgCl2,10mM DTT,1mM ATP,10μM 5'-[P]-(A)12-18(10μM in 5'-termini)。

纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷1酸酯酶。

酶储存溶液:10mM Tris-HCl(pH7.5),1mM DTT,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X):500mM HEPES-NaOH(pH8.0 at 25℃),100mM MgCl2,100mM DTT。







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