化学试剂的纯度对检测结果的准确性有较大的影响,但是试剂纯度越高,其价格也越贵。所以应该根据检测任务,检测方法以及对检测结果准确度的要求选用不同规格的试剂。化学试剂选用的原则是在满足检测要求的前提下,选择试剂的级别应尽可能低,既不要超级别而造成浪费,也不能随意降低试剂级别而降低检测结果的准确度。对痕量检测应选高纯度规格的试剂,以降低空白值,对于仲裁检测一般选用优级纯和检测纯试剂。
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化学试剂的纯度对检测结果的准确性有较大的影响,但是试剂纯度越高,其价格也越贵。所以应该根据检测任务,检测方法以及对检测结果准确度的要求选用不同规格的试剂。化学试剂选用的原则是在满足检测要求的前提下,选择试剂的级别应尽可能低,既不要超级别而造成浪费,也不能随意降低试剂级别而降低检测结果的准确度。对痕量检测应选高纯度规格的试剂,以降低空白值,对于仲裁检测一般选用优级纯和检测纯试剂。
3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤:
1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。
2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中,加入足够量浓度的生物素,一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数,对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍,或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中
3. 室温30分钟,或冰上放置2小时。
4. 用30 ml PBS预洗纯化柱,上样,加入与欲收集量相同的缓冲液,收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。
对于一般试剂,如元机盐,应存放有序地放在试剂柜内,可按元素周期系类族,或按酸、碱、盐、氧化物等分类存放。存放试剂时,要注意化学试剂的存放期限,某些试剂在存放过程中会逐渐变质,甚至形成危害物。如醚类、四氢、二氧六环、烯、液体石蜡等,在见光条件下,若接触空气可形成过氧化物,放置时间越久越危险。某些具有还原性的试剂,如、TiCl3、四氢硼钠、FeS04、维生素c、维生素E以及金属铁丝、铝、镁、等易被空气中氧所氧化变质。
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