哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。
将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注0射、电穿孔、脂质体介导的转染，以及zui近出现的以高分子聚合物为载体的基因传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统zu
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哺乳动物的转染技术在60年代末70年代初即已引入。
将外源DNA 导入哺乳动物细胞的方法大致可分为两大类，即生物方法和物理化学方法。物理化学方法中常用的有磷酸钙法、显微注0射、电穿孔、脂质体介导的转染，以及zui近出现的以高分子聚合物为载体的基因传递技术。生物方法则主要是以病毒作为载体,通过病毒感0染的方式将外源DNA 导入到细胞中, 其中以逆转录病毒及腺病毒转染系统zui为常用。
磷酸钙在良好的转染条件下，可以在293T等细胞的转染达到较高的转染效率。但磷酸钙转染有一个突出的问题，非常不稳定，尤其受PH值的影响非常大，在实验中使用的每种试剂都必须小心校准，保证质量，因为甚至偏离zui优条件十分之一个PH都可能导致磷酸钙转染的失败，经常即使zui熟练的转染实验者也不能保证每次磷酸钙转染的成功，他们可能经常为莫名其妙的转染失败而沮丧。同时，他们还经常发现，往往小体积的转染比如6孔板以下的转染效果比较理想，可一换到大皿，经常转染效率下降很快。磷酸钙的先天缺陷往往是实验梗阻的主要原因。
已有众多的文献报道，脂质体本身会参与细胞生理活动,引起基因表达的上调或下调。如参与PKC（蛋白激酶C）通路调节(Biochemistry.1992 Sep 22;31(37): 9025-30)；如抑制ATP酶的活性(Biochim Biophys Acta.2008 Apr;1777(4):362-8)；如与线粒体膜发生作用(J Biol Chem. 1989 Jan 25;264(3):1508-15)；转染siRNA造成脱靶效应等等。细胞毒性的大小往往意味着对细胞生理活动影响的大小，脂质体这些作用是造成细胞毒性的根本原因。这会对相关研究数据产生严重的干扰，甚至影响研究的结论。这已引起了许多研究者的注意。
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将上述复合物直接加入到细胞培养基中，轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。备注：转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。在极0少情况下会出现贴壁细胞脱落现象，可先从待转染细胞孔中吸取 500μl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染，直接加入到无细胞贴壁的对面或侧面并摇匀即可。
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