转染试剂是一种新型高1效的阳离子聚合物。它可以与核酸(包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸)相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内,适用于大部分真核细胞的细胞转染。
转染效率较高,ABclonal 选取多种常见细胞系(包括 HEK293T、HCT116、HeLa、A549、C6、HEK293F 等),分别使用 HighGene 转染试剂和市面常规转染试剂产品进行
lipo3000转染试剂
转染试剂是一种新型高1效的阳离子聚合物。它可以与核酸(包括质粒、siRNA、寡聚核苷酸)相互作用形成一种复合物将核酸转运到真核细胞内,适用于大部分真核细胞的细胞转染。
转染效率较高,ABclonal 选取多种常见细胞系(包括 HEK293T、HCT116、HeLa、A549、C6、HEK293F 等),分别使用 HighGene 转染试剂和市面常规转染试剂产品进行细胞转染
使用方法:
1. 转染前 18~24 小时接种细胞到 24 孔细胞板中,每孔 5~10×104细胞,1ml 完全培养基。备注:如果筛选抗药性稳定细胞系,可以考虑简化的实验步骤,即在细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
2. 将 2μg 质粒 DNA 和 3~5μl 转染试剂分别稀释到 50μl 生理盐水中。备注:质粒 DNA 和转染试剂的zui适用量需要根据不同培养基来优化,但理论上不超出 1~2μg 和 3~5μl 范围。
3. 合并上述两溶液并混匀。备注:无需其它转染试剂所需的 10~30 分钟的等候时间。
1. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,轻摇细胞板或用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。在极0少情况下会出现贴壁细胞脱落现象,可先从待转染细胞孔中吸取 500μl 培养基与转染复合物预混后再加入细胞中。若在细胞瓶中进行转染,直接加入到无细胞贴壁的对面或侧面并摇匀即可。
2. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。
3. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。
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使用方法
1. 将新鲜消化的 BHK-21 细胞接种到 24 孔细胞板中,每孔 1~2×105细胞,1ml 完全培养基。备注:可在生长旺盛的细胞传代后直接按下述步骤 2~5 进行转染,无需 18~24 小时的等候时间。
4. 将上述复合物直接加入到细胞培养基中,用加样器吸打混匀。备注:转染复合物可直接加入含血0清的细胞培养基中进行转染。
5. 将细胞板移至 37oC/5% CO2 孵箱中进行培养。备注:无需在转染后 4~6 小时补加血0清或更换培养基。
6. 24~72 小时后根据实验需要进行瞬时表达分析或稳定细胞系加压筛选。
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