6、潜热点应该出现在缓慢降温的第二步结束进入拉大温差的第三步前期；7、如潜热点位置出现时刻不对，可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点，形成新的优化程序，并进行新样品验证；8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准，有时即使曲线少有异常，但只要复苏效果好，可不关注；9、降温完成后转移样品至液氮罐，让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中谨防升温幅度过大（近距离转移，或放冻存容器
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6、潜热点应该出现在缓慢降温的第二步结束进入拉大温差的第三步前期；7、如潜热点位置出现时刻不对，可根据冻存曲线图调整第二步的结束温度点，形成新的优化程序，并进行新样品验证；8、复苏率是检验冻存是否成功的重要标准，有时即使曲线少有异常，但只要复苏效果好，可不关注；9、降温完成后转移样品至液氮罐，让其原生质形成玻璃化状态。转移过程中谨防升温幅度过大（近距离转移，或放冻存容器中转移）。
细胞往往会在温度剧烈变化中。通过使用细胞欣谕程序降温仪，选择合适的冻存液，设定合适的升降温速率，可有效地克服上述不利因素。实践证明，（经温度补尝后）每分钟1-3℃的冷冻速率可大大提高冻存细胞的存活率。传统的生物样本降温通常采用-80℃低温冰箱进行分步骤冷冻，该方法的不足为：耗时长，整个降温过程大约需要的时间；在降温过程中需要人为多次转移，给样本的降温带来众多不可控因素，从而导致样本的存活率降低；无法有效地消除结晶过程中释放的潜热，增大了样本的率。
细胞冷冻保存,1. 材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO (Sigma D-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene 5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、细胞冻存程序仪(也称为程序降温仪。冷冻保存方法：(1)传统方法: 冷存管置于4 ℃10分钟--->-20 ℃30分钟--->-80 ℃ 16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20 ℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量，亦可跳过此步骤直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降温：利用已设定程序的等速细胞冻存程序仪以-1～-3 ℃/分钟之速度由室温降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。
稳定阶段（从-110℃开始） 从比较大的安全性出发，拓纷程控速率冷冻仪在细管被取出之前，先将其冷却至-140℃。操作期间盖子管着的时候，拓纷程控速率冷冻仪里嵌入的微型开关确保设备能及时并自动地把温度降低到需要的水平。一个新型冷冻循环，运行速度快一旦细管被卸载取出，重新加热和烘干程序就会被气动。由于的工作效率和强大的加热组件（高达2500w），20分钟之内拓纷程控速率冷冻仪就会准备好开始一个新的制冷环节。
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