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水佐剂免0疫步骤
步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注：推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg（通常为10~20μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg（通常为1~2μg）。
HRP-兔抗牛IgG(H+L)
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水佐剂免0疫步骤
步骤一：用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度。备注：推荐使用的抗原用量为（1）免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg（通常为10~20μg）；（2）免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg（通常为1~2μg）。
步骤二：充分混匀佐剂，无菌条件下取出所需量与抗原按体积比1:1迅速混匀。备注：本佐剂产生沉淀属正常现象，与抗原混合操作越快越好。
步骤三：通过后腿小腿肌肉注射免0疫小鼠，每只小鼠100μl。备注：本佐剂与抗原混合后产生沉淀属正常现象，抽入针管前应充分混匀，抽入针管后应尽快注射。
步骤四：第21天按同样方式加强免0疫一针。备注：每次佐剂和抗原现配现用。
步骤五、第35天采微量尾血进行ELISA测定，抗0体滴度应在1:10000~1:10000000 范围内， 随后即可摘眼球采全血或进行脾细胞融合。备注：若极偶尔情况下抗0体滴度达不到实验需求，可在第42天再按同样方式加强免0疫一针。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗，涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗；品类的内参标签抗0体；另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
取血：
免0疫一周后，可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低，头两次取血，够检测用即可。在三次免0疫后，可以获得较高0效价的抗0体，每次取血量可以在40ml，不要取太多，否则会造成兔子贫0血。
前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血，室温过夜析出血0清。
zui后一次取血可以采用颈动脉放血，具体操作如下：
1、家兔仰卧于兔架上固定头部，用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。
2、沿颈部中线用手术刀切开皮肤约10cm，分离皮下结缔组织，直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作，如碰到小血管出血，可用止血钳止血)。
3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织，暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离，剥离神经和结缔组织。
4、于动脉下套入两根黑丝线，分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。
5、用小拇指垫在血管下，用尖头眼0科手术剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断)，插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上，以防放血管滑脱。
6、松开止血钳，使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。
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天然抗0体不仅包括针对病原微生物及其产物的抗0体，也包括针对非病原性物质的抗0体，如血型抗0体。除血型抗0体主要是受遗传因素的影响外，其余的天然抗0体可能是因隐性或因受共同抗原刺激而产生的。由于人或动物在出生后总是不断地接触各种抗原，所以有人认为天然抗0体的产生与细菌、食物、花粉或异物的刺激有关。因此，“天然”二字的使用并不确切，仅是习惯用法。在一个地区内，天然抗0体的平均水平对诊断疾病有一定的参考价值。
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