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样品如果溶解度太低如何上制备HPLC?
(1)了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。
(2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂以助溶。
(3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择甲醇,THF或DMSO等溶解样品。特别是
高压制备色谱系统方法
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视频作者:北京通恒科技有限公司
样品如果溶解度太低如何上制备HPLC?
(1)了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。
(2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂以助溶。
(3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择甲醇,THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO,对一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留,不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱,一般不会影响峰型。
(4)可以固体上样。
工业制备色谱
制备纯化效率:对整个色谱制备纯化工艺的评价,尤其是成本方面的考量。
纯度、收率都是有定量的数值决定,而制备纯化效率则是个复杂的评价过程,这个过程主要是对成本(物料成本、时间成本、人力成本)、安全性、一致性等多个方面考量。分离纯化工艺中的进样量、纯化时间、纯化重现性(一致性)、安全性等等都是实际生产过程中各企业需要考虑到的方面,尤其是成规模的企业对制备效率(成本、一致性、安全性)的控制极为看重。
疏水色谱填料
在传统固定相长链根部嵌入特殊基团,该“极性嵌入基团”能够和硅胶表面的硅羟基或流动相中的水形成氢键,对硅胶基质形成一种保护作用,且减少碱性化合物与硅羟基的作用,保证了碱性化合物的良好分离,对具有复杂结构的碱性化合物表现出不同于传统反相色谱的分离性能,即不需要“使用 pH>7 的流动相来抑制碱性物质的解离”的方式就可以对碱性物质实现良好的色谱保留;
流动相
HPLC中使用的流动相是液体,而在气相色谱法中则是气体。由于液体的密度和粘度较高,因此要使用泵来给流动相推动压力通过HPLC色谱柱,因此液相色谱的背压通常很高,比如超高压液相色谱。背压太高会对液相系统造成负担,因此适当的控制在合适的压力程度,有助于我们分析测试的正常运行。恒谱生的液相色谱柱、保护柱、在线过滤器等都能做到低背压,死体积小,避免对分析结果造成影响。
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