1. 9 腹0水效价的测定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL,包被Elisa 酶标板过夜,以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照,用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价,用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳,用 制 备 的 MRJ单克
水性佐剂
1. 9 腹0水效价的测定
1 mg /mL 的 MRJ 原核表达白每孔 100 μL,包被Elisa 酶标板过夜,以 SP2 /0 细胞培养上清为阴性对照,用间接 Elisa 方法检测腹0水的效价。同时 WesternBlot 检测抗0体使用于 Western Blot 的效价,用 MRJ 重组蛋白做 抗 原 进 行 SDS-PAGE 电 泳,用 制 备 的 MRJ单克0隆 抗0体 作 为 一 抗,设置抗0体稀释浓度 分别为1∶ 500; 1 ∶ 1 000; 1 ∶ 2 000; 1 ∶ 3 000; 1 ∶ 5 000。进 行Western Blot 检测。

单抗腹0水制备用佐剂
货号规格KX0210048-1010mlKX0210048-500500ml 将佐剂注射BALB/C小鼠腹腔,每只0.3-0.5ml处理腹腔15天左右(一般12-18天),然后注射杂交瘤细胞,建议每只注射80万-100万个。腹0水会比普通佐剂晚出1.5天-2天,但通常情况下腹0水的量是普通佐剂出量的1.5-2倍,且单抗腹0水效价不变。
使用方法
1. 用生理盐水将抗原稀释到2倍zui终浓度(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为小鼠每针次10-20μg、家兔每针次20-50μg。
2. 用振荡器充分混匀佐剂,无菌条件下取出所需用量(按小鼠每针次50μl、家兔每针次100μl)与抗原按体积比1:1混合,并用振荡器剧烈振荡5-10min,直至静止放置10min水油相不分层。备注:与抗原混合前佐剂分层属正常现象,但必须充分混匀后才能取用。
3. 通过皮下或肌肉单点注射免0疫动物,小鼠每针次100μl,家兔每针次200μl。
(1)佐剂与抗原混合后应尽快注射,若放置时间较长出现水油相分层,则必须按上述步骤2重新振荡混匀;
(2)抽入针管前应摇匀,抽入针管后应尽快注射;
(3)尽量选择引流淋巴0结附近(如腋窝和腹0股0沟附近)的皮下或肌肉进行免0疫。
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