低温生物的脱水存法
①沙土保存法,能产孢子的细菌、线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子
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低温生物的脱水存法
①沙土保存法,能产孢子的细菌、线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合,经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2~3次,烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子,用无菌蒸馏水2~2.5ml制成孢子悬液,吸取少许加入沙土管中,经真空抽干,外观呈松散状态,于4℃冰箱保存,保存期可达5~7年。
② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂(一般用脱脂牛奶)相混合,放在安瓿管内于-20~-30℃的乙醇浴中速冻。然后,在低温下用真空泵抽干,并用干冰使水汽结冻,熔封安瓿管,于低温下保存。保存期可达5~10年之久。
③ 石蜡油封存法,在斜面培养物上,倒上灭菌后的石蜡油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低温干燥处保存,此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物,保存期为一年以上。
低温生物德选育和培养
要看你选什么规模的发酵是小试还是中试还是生产?另外,你说的选育里应该是包括了培养基配制和扩大培养。所以,只能大概列一下。
选育:超低温冰箱、无菌室、培养箱、摇床、分光光度计、检测设备。
培养基配制:电子天平、pH计、灭菌锅、微波炉、电磁炉、冰箱。
扩大再培养:灭菌锅、摇床、抽滤瓶(或特质金属瓶)、空调机组、臭氧发生器。
发酵:配料罐、种子罐、发酵罐、补料罐(小试用流加泵)、有时会用到在线监测设备如乙醇检测仪、生物传感器、分光光度计等、空压机、。
分离提纯:制水设备、制冷设备、浓缩机、细胞破碎仪、离心机、陶瓷膜、真空干燥设备、超低温冷干机、造粒设备(不同产品用到不同的烘干设备)等,不同工艺所用设备也不同
低温生物退化的原因是什么?
退化(degeneration):在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某 些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象,称为的退化。退化不是突然发生的,而是从量变到质变的逐步演变过程。开始时,在群体细胞中仅有个别细胞发生自发突变(一般均为负变),不会使群体菌株性能发生改变。经过连续传代,群体中的负变个体达到一定数量,发展成为优势群体,从而使整个群体表现为严重的退。经分析发现,导致这一现象的原因有以下几方面。
1. 基因突变:1.有关基因发生负突变导致退化 退化的主要原因是有关基因的负突变。如果控制产量的基因发生负突变,则表现为产量下降;如果控制孢子生成的基因发生负突变,则产生孢子的能力下降。在移种传代过程中会发生自发突变。虽然自发突变的几率很低(一般为10-6~10-9),尤其是对于某一特定基因来说,突变频率更低。但是由于微生物具有极高的代谢繁殖能力,随着传代次数增加,退细胞的数目就会不断增加,在数量上逐渐占优势,成为一株退化了的菌株。
2.表型延迟造成退化 表型延迟现象也会造成退化。如,在诱变育种过程中,经常会发现某菌株初筛时产量较高,进行复筛时产量却下降了。
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