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液相色谱柱基本工作原理
在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的医学教育网搜集整理。
使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱
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液相色谱柱基本工作原理
在色谱法中存在两相,一相是固定不动的,我们把它叫做固定相;另一相则不断流过固定相,我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的医学教育网搜集整理。
使用外力使含有样品的流动相(气体、液体)通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时,混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
固相萃取柱和液相色谱柱的比较
两者本质上是不同的东西,固相萃取柱是用来做固相萃取用的,主要作用是过滤和富集样品,而液相色谱柱是液相色谱上使用的,用来分析样品的。
固相萃取柱是样品处理的时候用的,液相色谱柱是仪器上的一个配件相当于,机子不可或缺的一部分,使组分分开才进检测器检测的。
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液相色谱柱作用
柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效,这是值得的。通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。柱子使用一段时间后,可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶,特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷,使柱效下降,这时也可补加填料使柱效恢复。
每次工作完后,好用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用,应每隔4~5天开机冲洗15分钟。
液相色谱分析仪基本上系统软件构成介绍
气相系统软件包含进样器和汽化室,它的功用是引进试件,并使试件一瞬间汽化。汽体样品可以用六通阀气相,进样量由定量分析管操纵,能够按必须拆换,进样量的重复性可以达到0.5%。液态样品可以用少量气相,重复性较为差,在运用时,在容积下应用。工业生产步骤色谱和大批样品的常用剖析上常见全自动进样器,重复性非常好。在毛细管柱气象色谱仪中,因为毛细管柱样品容积不大,一般选用分离进样器,进样量比较多,样品汽化后仅有一小部分被载气带到离子交换柱,绝大多数被放空自己。