ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，
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ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。
Elisa试剂盒操作步骤
1、固相载体的挑选：许多物质可作为固相载体，如聚乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方式可所以凹孔平板、试管、珠粒等。
2、包被或抗原的挑选：将或抗原吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。
3、 酶标记作业浓度的挑选：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定。然后再固定其它条件或采取“方阵法'，在正式试验体系里准确地滴定其作业浓度。
4、酶的底物及供氢体的挑选：对供氢体的挑选要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。
Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
重复性不佳，高CV值
1 样品不均一 加样前充分混匀样品，取样确保移液位置一致；
2 包被板表面遭到破坏 洗板加样时尽量小心，避免破坏板的包被表面
3 孔与孔之间的交叉污染 孵育后取下盖子小心操作，避免孔与孔的污染；封板膜不能重复使用
4 加样量不一致 样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴
5 边缘效应（外周孔显色较中心孔深） 孵育时尽量100 rpm旋转混匀
6 微量加样不准确 保证微量加样的准确性和均一性
7 不正确的洗涤 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，确定每一步的洗涤
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