动物实验检测的取材要求介绍:
实验小鼠取材要求
采血后,立即将血液放入1.5mL离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让血液在室温下静置30-60分钟。在相对离心力(relativecentrifugalforce,RCF)14000g下离心血样10-15分钟,用移液管吸取分离,并转移到干净的离心管中。可将样本在14000g下再离心2-3分钟,以分离任何剩余的红
动物全自动生化检测
动物实验检测的取材要求介绍:
实验小鼠取材要求
采血后,立即将血液放入1.5mL离心管(不需加抗凝剂或防腐剂)。让血液在室温下静置30-60分钟。在相对离心力(relativecentrifugalforce,RCF)14000g下离心血样10-15分钟,用移液管吸取分离,并转移到干净的离心管中。可将样本在14000g下再离心2-3分钟,以分离任何剩余的红细胞。将分离好的转移到干净的离心管中。
原位杂交涉及的步骤:玻片的准备和样品固定,细胞或组织的预渗透处理,靶DNA变性(DNA原位杂交),探针制备,原位杂交过程,杂交后洗涤,探针(显色)检测。
玻片的准备和样品固定
对于染色体涂片,1:1的乙醇/醚处理的载玻片已能符合要求。对于组织切片的原位杂交,为了在实验过程中不丢失组织样品,可使用多聚赖氨酸或铬矾明胶包被的载玻片。
样品的固定步骤是为了保持样品的原有形态学。样品固定是原位杂交中的步骤,从化学反应角度来看,固定剂的使用和选择对后续杂交的影响不会太大,因为核酸杂交的功能分子基团被安全地包裹在DNA双螺旋结构中,而交联剂的使用对RNA基本没有影响。对于染色体涂片,常使用/固定;石蜡包埋的组织切片用固定。冷冻切片可通过在4%的甲醛溶液中固定30min,或使用Bouin固定剂。
肝纤维化动物模型特点:
①肝纤维化出现早,出现率高;
②动物整体损伤轻微,毛发、生长情况正常;
③纤维化组织中大量胶原,Ⅲ、Ⅳ型前胶原mRNA增多。
慢性活动性患者循环复合物多为阳性,猪模型可用于慢性所致肝纤维化的研究,对于研究复合物的形成,沉积和清除及对于防治损伤性肝纤维化有效的筛选,具有意义。
(IDA)发生的主要原因是由于铁的摄入不足和/或铁丢失过多,引起机体血红蛋白合成障碍导
致。IDA模型有大鼠、小鼠、兔、鸡、猫、狗、猴等,其中以大鼠为常用。
动物模型方法:
1. 给予低铁饮食。饲料含铁量≥50mg/kg能满足大鼠的基本需要,低铁饲料的铁含量≤10mg/kg,标准饲
料铁含量为220-270mg/kg。饲料配方以酪蛋白或脱脂奶粉作为蛋白来源,玉米淀粉或蔗糖作为碳水化合物来源,加入植物油,混合维生素和混合无机盐配制。
近来通过络合剂1%EDTA-2Na除去国产饲料中的铁,取得满意的实验结果。
2. 给动物逐次少量放血,造成铁的慢性丢失。通常采用剪尾的方法,一方面放血不但引起铁的丢失,而且还可以引起其它营养素的丢失;另一方面剪尾易
引起动物而。
3. 低铁饮食辅以定期少量放血。
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