注：对于灵敏度要求不是极高的普通实验室的染胶实验，一般染色10-20分钟（可以将100ng含量以上的蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；
对于灵敏度要求极高的染胶实验，一般可采用染色1-2小时（可以将10ng含量蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；
一般染色2小时后，蛋白条带基本不会再加深，而背景会继续加深，所以一般建议染色不要超过2
ELISA通用试剂盒
注：对于灵敏度要求不是极高的普通实验室的染胶实验，一般染色10-20分钟（可以将100ng含量以上的蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；
对于灵敏度要求极高的染胶实验，一般可采用染色1-2小时（可以将10ng含量蛋白染出条带），低背景，无需脱色，直接观察或者拍照；
一般染色2小时后，蛋白条带基本不会再加深，而背景会继续加深，所以一般建议染色不要超过2小时。
异硫qing酸荧光素（FITC）是免0疫分析中zui常用的荧光物质，FITC-酪胺信号放大系统可显著增强基于辣根过氧化物酶标记的ELISA和免0疫组化的检测灵敏度。
FITC-酪胺在辣根过氧化物酶催化下氧化，产物迅速共价结合在固定相蛋白质上，再检测FITC（荧光检测或用标记的抗FITC抗0体检测）。
通过此技术，可显著提高检测的灵敏度和降低试剂的使用量。
信号放大首0选生物素-酪胺信号放大试剂盒（链接），但如果样品存在含生物素等情况，可以选择本试剂盒。
通用步骤
加血0清封闭液
1. 去掉片子上多余缓冲液。
2. 取适量血0清封闭液完全覆盖切片。
3. 在湿盒中室温孵育 15min。
4. 浸入洗涤缓冲液中 5min。
加一抗
1. 去掉切片上的多余洗涤缓冲液。
2. 将稀释的一抗加到切片上，完全覆盖组织细胞。
3. 在湿盒中室温孵育 30min。
4. 用洗涤缓冲液洗去一抗，在洗液中润洗 5min。
注：如果显色速度过快，建议进一步稀释一抗，将一抗稀释度以 1/50、1/100、1/200、1/400 和 1/800，zui佳稀释度的选择是显色 10min 后阳性显色效果满意而没有背景显色。
注意事项
1. 用辣根过氧化物酶时不要使用含有叠氮钠的试剂。
2. 避免使用含次氯酸的去污剂。
3. 设阳性对照、阴性对照和试剂对照。
4. 不要使用卵清蛋白作为切片粘连剂，使用明胶或多聚赖氨酸。
5. 孵育过程中不要使片子干掉。
6. 洗涤后洗涤液尽量去净。
7. 用低熔点石蜡以减少抗原变性（> 60°C）。
8. 用新鲜配制的 4%缓冲多聚甲醛可更好保存抗原活性。
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