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经过长期人工饲养的小白鼠，对环境的适性差，不耐冷热，要求生活在清洁无尘，空气新鲜，温度在18～22℃，相对湿度50～60%，噪音85分贝以下，氨浓度20PPm．通风换气8～12次/小时的环境中。因此，它对饲养房舍的建筑、环境条件要求比较严格。当气温高于35℃，要采取综合的降温保护措施，否则母鼠会口渴、吃仔或中暑死1亡。国外饲养实验小白鼠多采用全封闭式的饲养设施，室内温度。湿度、光照、通风全部自动控制。
小白鼠喜欢吃香脆的干饼，可用面粉20%、麦麸皮15%、高粱面或梗米面10%、玉米面15%、豆面20%、豆饼20%、鱼粉5%、骨粉3%、鱼肝油1%、酵母粉1%、食1盐1%等，加水和面，烤成饼。并密封保存备用。纯系小白鼠对营养成分要求高，对营养变化也极为敏感，如DBA/2纯系小白鼠需要高蛋白质低脂肪的饲料。另外，每天要给一些青饲料，如胡萝卜、黄瓜、青菜等。青饲料要洗净晾干，不可多喂。
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