动物模型设计注意事项
注意所选用动物的实用价值
模型应适用于多数研究者使用,容易,实验中便于操作和采集各种标本。同时应该一般饲养员较熟悉而便于饲养的动物作研究对象,这样,就无需特殊的饲养设施和转运条件,经济上和技术上容易得到保证。
此外,动物来源必须充足,选用多胎分娩的动物对扩大样本和重复实验是有益的。尤其对慢性疾病模型来说,动物须有一定的生存期,便于长期观察
动物实验课题外包费用
动物模型设计注意事项
注意所选用动物的实用价值
模型应适用于多数研究者使用,容易,实验中便于操作和采集各种标本。同时应该一般饲养员较熟悉而便于饲养的动物作研究对象,这样,就无需特殊的饲养设施和转运条件,经济上和技术上容易得到保证。
此外,动物来源必须充足,选用多胎分娩的动物对扩大样本和重复实验是有益的。尤其对慢性疾病模型来说,动物须有一定的生存期,便于长期观察使用,以免模型完成时动物已频于或毙于。
在自然环境中观察有助于正确评价自然发病率和率。但记录困难,在实验条件下维持有一定难度,且对人和家畜有直接和间接的威胁,使用时要特别加以注意。因此,模型时必须注意动物种群的选择,要了解各类动物种群的特点和对动物的影响。
抑yu症应激动物模型
(一)行为绝望模型
行为绝望模型具有简单、、敏感等特点,常用于抗抑郁yao物的筛选。小鼠悬尾实验:悬尾小鼠为克服不正常体位而挣扎活动,但活动一定时间后,出现间断性不动,显示“绝望”状态,多数抗抑郁药可有效缩短小鼠的不动时间。
(二)获得性无助模型
获得性无助是一种当大鼠接受无法控制或预知的厌恶xing刺激后,将其放在可以逃避dian击的环境中时,呈现出的逃避行为欠缺的现象,同时可伴有如食欲减退、体重减轻、运动性活动减少、攻击性降低等现象。多种临床对抑yu症有效的yao物和zhi疗方法可逆转“获得性无助”现象。因此要求研究者懂得,各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响,以及动物疾病在组织学、生化学、病理学等方面与人类疾病之间的差异。
(三)慢性不可预见性应激模型
大鼠经历一系列严重的应激因子(如噪声、强光刺激、长时间行为限制等)后表现出活动能力下降。将几种不同的应激因子在实验全程中应用,顺序随机,使动物不能预料刺激的发生。主要模拟了人类yi郁的症状即快感缺乏,同时模拟了其他重型yi郁障碍的症状表现。如运动能力及社会交往能力下降、探索行为能力下降、qin犯攻击能力缺陷、xing行为能力下降等。KA的人工合成品即合成红藻氨酸(syntheticalkainicacid,SKA)腹腔注射。
(四)孕期应激致子代抑郁模型
出生前暴露在应激条件下的SD大鼠,成年期会出现持续的行为、神经内分泌和睡眠结构等改变,如行为焦躁、HPA轴功能亢进、矛盾睡眠增加,并与血浆皮质酮水平高度相关。在睡眠中的突出变化在很大程度上与yi郁障碍患者相似。
(五)社会挫败模型
具代表性的是地鼠的压抑模型,它是人为地将雄性地鼠配对饲养在同一环境中。两鼠之间会有“强”、“弱”之分,在“强”鼠面前,“弱”鼠出现体重减轻、自主活动减少、 HPA轴及交感神经亢奋的表现。这些症状可在一定程度上被一定剂量的抗yi郁药反转。
实验动物大、小鼠的采血方法
1、动物实验中剪尾采血:需血量少时可用此方法。将动物固定,显露尾部,将尾尘剪去约5mm,从尾根部向尾端部,血即从断端流出。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟,使尾部血管充盈,可采到较多的血,但注意二可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。如将动物取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml,大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
2、动物实验中摘眼球采血:此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球突出,右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球,立即将鼠倒置,头朝下,眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活,可采另一侧眼球取血。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。
大鼠后眼框静脉丛取血方法
4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血:将鼠,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈静脉或颈动脉分离手术,用即可抽出所需血量。也可插入导管,反复采血。
5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器中。
6、心脏采血:将动物,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮肤,在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进入。亦可在动物后,切开动物胸腔,直视心脏内抽血或剪破心脏,直接用、吸管等吸血。
膀胱原位癌模型方法
分组及处理雌性C57BL/6小鼠150只,随机.分成A(膀胱粘膜未预处理组).B(膀胱粘膜预处理表浅模型观察组),C(膀胱粘膜预处理丝lie霉su治liao组)、D(膀胱粘膜预处理PBSzhi疗对照组)和E(膀胱粘膜预处理不zhi疗生存期观察组)5组,每组30只。在灌注MB49膀胱ai细胞前,其中A组不进行预处理,B、C、D和E组则对膀胱粘膜进行预处理。在灌注MB49膀胱ai细胞后,A组不作任何处理;B组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官组织(膀胱、shen、输尿管.心、肝、肺、脾)做病理切片(HE和免yi组化染色);C组在灌注后di1天开始给予si裂mei素(0.05 mg/ml)0.1 m'膀胱灌注zhi疗,每隔3d1次,连续6次;D组灌注后di1天开始给予PBS膀胱灌注,每隔3dl次,连续6次;E组不作处理。所有小鼠观察- - 般情况(精神状态、饮食、体质量等)zhong瘤生长情况(是否成瘤.肿liu大小.有无血尿、远处转移等)和生存期,并对si亡小鼠进行解剖,留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定(C.D组小鼠膀胱固定前称重)。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。灌注后第60天,处死A.C.D和E组未si亡小鼠,解剖并留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定,C、D.E组小鼠膀胱固定前称质量,
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