(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；
(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余组织再消化
动物全自动生化检测
(1)75% (体积分数)酒精消毒孕鼠,在无菌条件下取出胎鼠,分离并切取脊髓,置于冷的无钙、镁的HBSS液的平皿中( 下置冰袋)。
(2)解剖显微镜无菌条件下仔细剥离脊膜及血管。
(3)用弹簧剪将脊髓剪成1cm3大小，消化液37℃消化15-20min，每五分钟振荡一次；
(4)去掉上清，加入终止液终止消化，吹打10-15次，不能有气泡，收集上清，剩余组织再消化一次。
(5)4℃1000rpm离心10min，弃上清，加入种植液1重悬，培养箱内差速贴壁30min；
(6)收集上清，台盼蓝染色计数，按6*105cells/孔种入六孔板（种植液1），37℃，5%CO2，95%饱和湿度的培养箱中培养；
(7)培养第二天，全换液更换为种植液2；
(8)培养第四天，半量换液加入5uM的，24h全量换液；
(9)之后每周换液两次。
有关动物实验室检测的要求及标准
动物实验室又叫动物房，是指适宜于饲养、繁育实验动物的建筑物。这类建筑应具有特定的环境要求和实验手段，以保证动物的和实验研究的准确可靠性。建设动物实验室时有着不一样的要求及标准，今天咱们主要来看看动物实验室建设的标准有哪些？
1．SPF级动物实验室：
SPF及动物实验室符合动物居住的要求，严格控制人员、物品和空气的进出，适用于饲育清洁级或无特定病原体级实验动物。经过的监测中心检测，通过现场验收的屏障环境，才可以作为清洁级或SPF级动物的饲养环境。
2．实验室动物房|动物实验室|动物研究室分类及标准：
实验室根据实验动物微生物控制标准，可将实验动物分为四级，分别是普通动物、清洁动物、无特殊病原体动物、无菌或栖生动物。
肝纤维化动物模型造模方法：
1.法：
性肝纤维化产生的机理是Ⅲ型反应引起，白蛋白和的大分子物质，作为异种抗原进入大鼠体内后，刺激其产生相应的，当抗原再次进人机体后抗原结合，形成抗原—复合物(IC)，抗原的反复、长期刺激，过量的复合物来不及被清除，沉积于的血管壁内外，引起血管炎，造成肝损伤。反复导致肝细胞变性、坏死，再生，纤维等变化，后发展为肝纤维化、。
动物选用雄性Wistar大鼠，体重130g左右。取猪0.5ml，腹腔内注射，每周2次，共8次(猪的制备：取新鲜猪血，离心制，滤过，分装放低温冰箱备用)。
评价:
大鼠第3周出现肝细胞变性、坏死，第4周的胶原纤维形成纤维束，从静脉到门管区之间相互伸延，发生纤维化。
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