本试剂盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之，将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体，已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育，洗掉所有试剂，加入底物进
cGMP assaykit
本试剂盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之，将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体，已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育，洗掉所有试剂，加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上，于450nm或405nm波长下，进行读数。黄色的光强度与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线，通过测得的光密度可以计算出样品中cAMP的浓度。
对于生长的组织培养液中的细胞，首先移除培养基，然后加入0.1M HCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解；如果裂解不充分，接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心，收集上清直接用于实验。临用前在0.1M HCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x 100可增强细胞和组织裂解。在这个浓度范围内，去污剂并不干扰试验的结合部位，但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度，为了较精l确的测定，标准曲线需以相同方式稀释。取1 mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸，600g离心力于室温离心，上清液直接用于实验测定分析。
结果计算
样品中cAMP浓度有多种计算方法。X轴表示cAMP标准品浓度，Y轴表示净光密度的平均值或者百分比值。
1 样品和标准品的净光密度(OD)平均值的计算：
净OD平均值 = OD平均值 － NSB孔OD平均值
2 计算不同梯度浓度标准品的结合率占较大结合率(B0孔)的百分比，计算公式 如下：
百分比值 = (净OD平均值/ B0孔OD平均值)×100
3 绘制净OD平均值或百分比值对cAMP标准品浓度的Logit-Log曲线。通过插值即可得到样品中cAMP浓度。
包括以下步骤：1)抗原表位的计算机筛选；2)抗原的制备；3)血l清的采集；4)间接ELISA方法的建立；5)间接ELISA方法的敏感性和特异性验证；6)试剂盒的稳定性验证；7)对屠宰场进行临床检测。该方法简单、、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感l染猪的戊型肝l炎病毒，适用于大批量发病样本的检测，可用于猪戊肝的诊断，并预防、控制猪戊肝l病毒的流行和阻断戊肝l病毒由猪向人传播。
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