武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
用于原位杂交的探针可以
ISH
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
用于原位杂交的探针可以是单链或双链DNA,也可以是RNA探针。通常探针操作的长度以100-400nt为宜,过长则杂交率减低。近研究结果表明,寡核苷酸探针(16-30 nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针,因此,寡核苷酸探针和不对称PCR标记的小DNA探针或体外转录标记的RNA探针是组织原位杂交优选探针。③癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台。可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。
杂交与显色
杂交将已标记的探针加入预杂交液即成为杂交液(探针浓度为1μg/m1),切片经2×SSC短暂浸洗后,滴加杂交液,于湿盒内置37℃或42℃孵育过夜。然后依次经2×SSC室温浸洗1h,l×SSC室温浸洗lh,0.5×SSC 37℃浸洗30min,0.5×SSC室温浸洗30min。注意滴加杂交液时切片勿干燥。同时在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术。
(简称原位杂交,in situ hybridization histochemistry;这些固定液都有不同的优缺点因此要根据具体的实验对象,选择的固定液。ISHH)属于分子杂交的一种,是一种应用标记探针与组织细胞中的待测核酸杂交,再应用标记物相关的检测系统,在核酸原有的位置将其显示出来的一种检测技术。原位杂交的本质就是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的核酸复性结合而使得组织细胞中的特异性核酸得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在核酸的原有位置上显示出来。
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