武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。
倒置平板,于37℃培养至划线的细菌
GISH
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。
倒置平板,于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。用Parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果裂解细菌,按本段下面所述方法,使释放的DNA结合于纤维素滤膜。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。
原位杂交是指用特定探针定位、检测DNA、RNA的一种有效的实验方法,通过把特点序列到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的RNA探针,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,来确定RNA或者DNA表达区域;本中心原位杂交探针采用的是和生物素标记,灵敏度和同位素相当。③FISH通过多次化学反应,使杂交信号增强,灵敏度提高,其灵敏度与性探针相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,GISH/ISH/FISH按照探针进行收费,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,GISH杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量大优惠!
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。亦可经15磅高压灭菌20min处理,可将载玻片上的核酸酶消除。
根据异源单链核酸分子间因结构互补发生共价键结合,能形成互补杂合双链,而进行分子遗传学研究的一种技术。一般载玻片可先经洗衣粉浸泡过夜,用流水冲洗、酸中浸泡4~8h,再用流水冲洗,双蒸水洗2~3次。双链核酸分子加热至80~100℃时,碱基对之间的氢键断开,形成两条单链,这一过程叫作核酸的变性作用或解链。变性的核酸分子慢慢冷却,互补的碱基对之间又会重新形成双链分子,这一过程叫作核酸的复性作用或退火。核酸分子在pH〉10和pH〈3的环境中也会变性,当条件适合时又可复性。核酸分子杂交技术是基于核酸变性与复性的原理。
武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年,是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司;公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、日化产品生产平台;可以开展各类动、植物、细菌、细胞等生物实验。与其他原位杂交技术相比,荧光原位杂交具有很多优点,主要体现在:①FISH不需要性同位素标记,更经济安全。

目的探讨荧光原位杂交技术(fluorescenceinsftuhybridization,FISH)在复杂染色体异常产前诊断中的应用价值。方法对8例羊水、3例脐血常规G显带具有复杂染色体异常的产前诊断孕妇,应用FISH技术确定其复杂染色体重排及标记染色体的组成。结果FISH技术证实了G显带平衡易位的结果,同时明确了3例羊水中衍生染色体的组成、2例脐血中标记染色体的来源。结论FISH技术具很高的敏感性和特异性,是明确染色体异常重要的分子细胞遗传学工具,其在产前诊断中的应用,可为临床提供的实验依据。
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