离子交换层析介质 离子交换层析介质
离子交换(IEC)是根据生物分子表面电荷(种类、数目和分布)差异实现对不同生物分子的分离的方法。纳微提供领i
先的基于单分散均一粒径聚合物微球的离子交换层析介质,经过亲水表面改性后再键合离子交换基团,根据应用需求的不同提
供四个系列的产品,满足捕获、中度纯化、精细纯化、分析纯化各环节的应用,具有的生物活性分
UniSil两相硅胶填料
离子交换层析介质 离子交换层析介质
离子交换(IEC)是根据生物分子表面电荷(种类、数目和分布)差异实现对不同生物分子的分离的方法。纳微提供领
i
先的基于单分散均一粒径聚合物微球的离子交换层析介质,经过亲水表面改性后再键合离子交换基团,根据应用需求的不同提
供四个系列的产品,满足捕获、中度纯化、精细纯化、分析纯化各环节的应用,具有的生物活性分子相容性和柱床稳定性,
为客户提供生物样品从实验室纯化到工业化生产的整体解决方案。
在纳微做出第三代硅胶色谱芯技术之前,硅胶色谱填料的发展已经历过两代技术的更新。
第
i一代技术是70年代研制开发的无定型硅胶,制备技术简单,填料形态不规则,粒径分布宽,装成的柱子柱效低,稳定性和重复性差,且使用寿命短,往往是一次性使用,因此会产生大量的固废物,造成巨大的环保压力,国外已逐步淘汰,国内仍在大规模生产。
第二代硅胶色谱填料产品是80年代国外开发出来球型硅胶色谱填料。这种填料形态一致性好,尤其是小粒径球形硅胶(<10微米)的出现,极大地改善了硅胶色谱填料的分离性能,使得制备色谱成为工业分离纯化
i重要的方法。因此球型硅胶被广泛地用于生物药(如胰岛素,多肽)、手性药
i物、抗
i生素、中药等大规模分离纯化。但由于其制备技术壁垒高,筛分设备昂贵,工艺技术复杂,长期以来,国内企业一直无法生产出合格的球型硅胶色谱填料。此外,上图还对比了在不同保留时间下,两款填料的DBC(动态结合能力)数值变化,可以明显的看出UniMab在同等保留时间下对目标蛋白的动态载量更高,由于层析都是在一定流速下进行的,因此填料的动态载量更能有效地用于指导确定上样量。
层析技术助推血液制品行业安全发展
随着分离工艺的发展,层析技术已越来越多地应用到血浆蛋白的分离和提纯中,其中应用广泛的是离子交换介质和亲和层析介质。亲和介质是建立在目标蛋白与固定化配基之间特异性、可逆相互作用基础上的蛋白分离技术,由于对目的蛋白具有高选择性和高收率等特点,亲和介质在病毒去除上也有很好的潜力。与其他同类的填料相比,UniVanco具有分离选择性好、回收率高、动态载量大、反压低、耐碱洗、柱效高、兼容水溶液和其他有机i溶剂、溶剂使用量少等优点,还可有效去除去氯万古霉i素等杂质,使产品纯度更符合USP、EP的要求。
从多年实践来看,将层析技术应用于血液制品的分离纯化以来,我们能够从根本上改变原有技术分离时间长、步骤繁琐、分离效果差、产品种类少、自动化程度低等缺点,有效提高了原料血浆的利用率及使用安全性,丰富了产品种类。从血浆蛋白如白蛋白类的实际纯化情况来看,阴离子交换层析在血浆蛋白纯化工艺中应用广泛,纳微的离子交换层析介质如UniDEAE和UniGel-80Q等就很适宜这方面的纯化,如结合低温乙醇法,在丙种球蛋白纯化后期用阴离子交换介质(UniDEAE或UniGel-80Q等)吸附二聚体等杂质提高纯度;白蛋白纯化使用UniGel-80Q阴离子交换吸附PKA、微量IgG和聚体等;此外,纳微UniPS5-100/300/500/1000也可用于聚合物分子量分布的测定以及聚合物中添加剂的分离与分析。凝血因子Ⅷ纯化用UniGel-80Q可以增加载量和收率。
理想的连续色谱层析介质:UniMab Protein A亲和层析介质
传统间歇式色谱(左)和新型连续色谱(右)洗脱概念图
在传统间歇式色谱法中,实验者只能采用单根色谱柱进行分离纯化,上样时只能序列式上样洗脱,这种方法虽然适合于绝大多数分离纯化,但其对于纯化介质的利用率并不高;显而易见的是,相对于传统“软胶”基质的层析介质而言,纳微研发生产的新型“硬胶”基质层析介质在可装填更高柱高、更大操作压力和线性流速、更高动态结合载量等诸多方面拥有着无可i比拟的优势。在新型的连续色谱层析法中,实验者可以同时平行使用多根色谱柱并进行上样和洗脱,整个洗脱过程处于不间断的持续进行中,这种方法可以确保使用更少的缓冲液来
i大化填料的利用率,目前已经证实这种新型色谱层析方案在手性和糖类化合物分离方面非常有效,尤其在单抗捕获方面经实际验证效果良好。单分散UniMab 亲和介质由于具备诸如粒径均一、柱效高、柱与柱重复性好,且机械强度高、反压低,在高流速下
i载量高等一系列优点,正好满足连续色谱高流速的要求。
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