实验动物的分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。例如诱发动脉粥样硬化时,草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多,而且病变部位并不出现在主动脉弓。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行
神经系统动物模型制备
实验动物的分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。例如诱发动脉粥样硬化时,草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多,而且病变部位并不出现在主动脉弓。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组:分组时应建立对照组。帮助一些因脊髓损伤而瘫痪的人接受康复治liao并使其行走更加自然。1.自身对照组:是指实验数据而言。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组:有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。3.具体分组时,应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号,然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时,应该用随机数字表示进行完全随机分组。
实验动物各种体液、的采集方法
消化液的采集
(一) 唾液
1. 直接抽取法 在急性实验中, 可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
2. 制造腮腺瘘法 在慢性实验中,收集狗的唾液,要用手术方法将腮腺导管开口移向体外,即以腮腺导管为中心,切成一直径约2~3cm的圆形粘膜片,将此粘膜片,与周围组织分开,穿过皮肤切口引到颊外,将带有导管开口的粘膜片与周围的皮肤缝合,腮腺分泌的唾液就流出颊外。他指出:“正在进行实验的实验小鼠会遭以想象的困扰,公众将不会支持这项研究,不会割断和瘫痪动物的脊椎,并会对人类造成长期的脊髓损伤。这种方法可以收集到较纯净的唾液。
(二)胃液
1. 直接收集胃液法 急性实验时,先将动物,将插胃管经口插入胃内,在灌胃管的出口连一,用此可收集到胃液,此法适用于狗等大型动物。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。如是大鼠,需手术剖腹,从幽门端向胃内插入一塑料管,再由口腔经食道将一塑料管插入前胃,用pH7.5、35℃左右的生理盐水,以12ml/h的流速灌胃,收集流出液,进行分析。
2. 制备胃瘘法 在慢性实验中,收集胃液多用胃瘘法,如全胃瘘法、巴氏小胃瘘法、海氏小胃瘘法等。HUVECs的迁移运动也随着PGE2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<。制备小胃是将动物的胃分离出一小部分,缝合起来形成小胃,主胃与小胃互不相通,主胃进行正常消化,从小胃可收集到纯净的胃液。应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。
(三)胰液和胆汁
在动物实验中,主要是通过对胰总管和胆总管的插管而获得胰液或胆汁。注射脱氢表雄酮后,模型动物的luan巢重量显著增加并呈多囊样改变,对闭锁luan泡进行显微测量其平均直径明显增大。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。
有时也可通过制备胰瘘和胆囊瘘来获得胰液和胆汁。
shen大部切除所致的慢性衰模型
5/6shen切除手术一期法:成年雄性Wistar 大鼠,先切除右shen,随后结扎左shen上、下极并切除之,不要损伤两侧shen上腺。大鼠的胰管与胆管汇集于一个总管,在其入肠处插管固定,并在近肝门处结扎和另行插管,可分别收集到胰液和胆汁。切除之shen组织称重,以右shen重量减去所切除的左shenshen组织重量来间接估算残余shen重量,并算出切除率。大鼠5/6shen切除后shen脏特征性改变有:shen脏早期代偿性肥大的,shen小球高灌注、高滤过、高压力,继之出现shen小球硬化、毛xi血管囊萎陷、系膜进行性扩张、小管间质性损害,后者表现为小管细胞萎缩、小管扩张、间质yan症细胞浸润、纤维化,zui终发展为进行性shen功衰。
Y迷宫实验几种常见的行为学测试方法
1、Y迷宫(Y-Maze)交替行为测试原理
Y-迷宫由Dellu F等发明,被广泛应用于功能减退、趋向性、空间工作记忆等研究领域。tang尿病模型tang尿病构建一般tang尿病模型构建的方法有:自发突变,饮食诱导,化学诱导,手术诱导,转基因/基因敲除等。Y迷宫主要用于研究啮齿类动空间工作记忆,其完全是利用实验动物对新异环境探索的天性,由于动物每次转换探索方向时都需要记住次探索过的方向,因此Y型迷宫实验能够有效地测定动物的空间工作能力。
1.1 Y迷宫交替行为测试及参数
自制Y迷宫,由3等长臂组成(50cm×18cm×35cm),每两个臂之间夹角为
120度,在处各有一个可移动的隔板,迷宫内臂及底部均涂为黑色。5cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15cm的大站台上,周围是水环境,水深3cm,平台在水面以上1cm,于平台以上14cm处放笼罩,上面放水和食物。参照文献实验操作方法并加以改进,将大鼠放在Y迷宫任意一臂末端,任其自由探索8min,摄像系统记录动物8min的行为变化,记录以下各项指标:①总进臂次数(the total number of entries):动物进入迷宫臂的次数(以大鼠四只脚均进入臂为进臂一次标准);②轮流(交替)一次(an alternation):依次连续进入Y迷宫全部三个臂一次。③*大轮流次数(The number of maximum alternati):总进臂次数-2。自发轮流行为得分=总轮流次数/*大轮流次数*。
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