生物素-酪胺信号放大试剂盒(HRP底物) 酪胺信号放大技术(TSA, Tyramide signal amplification)主要原理是,在过氧0化氢存在情况下,标记在抗0体上的HRP将底物酪胺活化,后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合,因此这些蛋白(如HRP、抗0体)上会富集大量带有生物素标记的酪胺,使信号被有效放大。生物素为小分子化合物,分子量244。亲
蛋白a残留检测(试剂盒)
生物素-酪胺信号放大试剂盒(HRP底物) 酪胺信号放大技术(TSA, Tyramide signal amplification)主要原理是,在过氧0化氢存在情况下,标记在抗0体上的HRP将底物酪胺活化,后者与相邻的蛋白上的酪氨酸残基生成稳定的共价结合,因此这些蛋白(如HRP、抗0体)上会富集大量带有生物素标记的酪胺,使信号被有效放大。生物素为小分子化合物,分子量244。亲和素与生物素有极高的亲和力,结合牢固,而且特异性高,每个亲和素可结合4个生物素。用小分子生物素与HRP酶标记的亲和素发生特异性反应,可减小抗原抗0体反应的空间位阻,使反应明显放大。
产品介绍
生物素/亲合素-HRP 系统提供在冰冻切片、石蜡包埋组织和细胞涂片中细胞表面抗原和胞内抗原和精0确定位的方法。试剂盒包括正常山羊或兔血0清、生物素标记的二抗和亲合素标记的 HRP。此系统与兔、小鼠来源的一抗使用。非特异性染色用与二抗同种动物的血0清封闭。组织、细胞片与未标记的一抗反应后,加生物素标记的二抗,孵育后,洗去二抗,与亲合素辣根酶孵育,洗去后加底物。
试剂盒组成
1. 洗涤缓冲液(10×浓缩):100ml×2
2. 血0清封闭液:含 10%灭活正常山羊,含防腐剂:50 ml
3. 生物素标记的二抗:含 2.0 μg/ml,0.01M PBS,pH7.4,稳定剂和防腐剂,工作液。规
格:山羊抗兔 50ml;或山羊抗小鼠 50ml
4. 亲合素-HRP,含 2.0 μg/mL,0.01M PBS, pH7.4,稳定剂和防腐剂,工作液,规格:亲
合素-HRP 50ml
操作步骤
石蜡切片
1. 脱蜡:二甲0苯,室温,2 次,每次 5~10min。
2. 水合 、、95%、90%、80%、70%乙醇、蒸馏水,每级 3min。
3. 在洗涤缓冲液中润洗 10min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)
5. 继续通用步骤。
冰冻切片
1. 空气中干燥切片,至少 1hr
2. 用前用合适的固定液固定,如果要延长保存时间,固定后在空气中干燥 1hr。 单独包装在铝箔袋中,–70°C 干燥保存,用前从冰箱取出,室温放置至少 1hr。
3. 浸入洗涤缓冲液中 10~15min。
4. 如有必要,封闭内源性过氧化物酶(含 0.3% H2O2 无水甲0醇)。
5. 继续通用步骤。
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