美国出版协会(AAP)于1998年创建了DOI以来,制定了标准,并建立了相应的解析系统,目前在出版界得到了广泛和成功的应用。DOI已用于期刊、电子书、技术报告、标准等各种文献类型的标识,并向与文献相关的科学数据、版权、甚至作者标识等多元化方向发展。截止2008年4月底,DOI的注册量已超过了3,000多万个,应用DOI的出版社和学会有2,500多家,图书馆1,300多个。万方数
佐剂
美国出版协会(AAP)于1998年创建了DOI以来,制定了标准,并建立了相应的解析系统,目前在出版界得到了广泛和成功的应用。DOI已用于期刊、电子书、技术报告、标准等各种文献类型的标识,并向与文献相关的科学数据、版权、甚至作者标识等多元化方向发展。截止2008年4月底,DOI的注册量已超过了3,000多万个,应用DOI的出版社和学会有2,500多家,图书馆1,300多个。万方数据公司已获得了在注册DOI代理机构权。
杂交瘤细胞的筛选与克0隆
细胞融合后,培养于添加了 HAT 的选择培养基的 96 孔板中,培养后半定量换液,培养基更换时应注意轻缓,第 5 天能在显微镜下看到明显的杂交瘤细胞克0隆,第 7 天左右,杂交瘤细胞能长至铺满孔底约 1 /10。此时进行 ELISA 检测养心细胞孔。取细胞培养上清对 MRJ 融合蛋白进行间接 Elisa检测,筛选出能分泌抗0体的杂交瘤细胞孔,有限稀释法对阳性孔进行亚克0隆,经过 3 次亚克0隆后,获得了能够稳定 分 泌 抗 MRJ 融合蛋白单克0隆抗0体的细胞株。对杂交瘤细胞株按从 96 孔板-24 孔板-10 cm 培养皿的顺序扩大培养,部分细胞用于腹0水制备单抗,部分细胞冻存备用。
分类
1.生物性佐剂是细菌或其产物,其本身具有免0疫原性,如分枝杆0菌(结0核杆0菌、卡介苗)、短小棒状杆0菌、百0日咳杆0菌、革兰阴性杆0菌内毒0素等。此外发现粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-l、白细胞介素-2、干扰素-γ等的佐剂活性。2.无机佐剂如氢氧化铝、明矾、磷酸铝等。3.人工合成佐剂双链多聚肌苷酸、胞苷酸、双链多聚腺苷酸。4.油剂花生油乳化佐剂、矿物油、植物油、羊毛脂等。5.弗氏佐剂弗氏佐剂又分弗氏不完全佐剂和完全弗氏佐剂,是目前动物实验中zui常见的佐剂,但易在注射局部形成肉芽肿和持久性溃疡,因此不适用于人体使用。近年来,人工合成胞壁酰二肽作为卡介苗细胞壁中的一种成分,用于提高疫0苗的接种效果,是对人体无不良反应的有效佐剂。
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弗氏完全佐剂是一种油包水的乳浊液,能够非常有效的诱导产生高滴度的抗0体。弗氏完全佐剂含结0核分枝杆0菌的细胞壁成分,可以加强对抗原的抗0体反应。佐剂活性来自于油滴中免0疫原的持续释放,并刺激局部免0疫反应。简单的说,这个注射入哺乳动物皮下之后,会产生炎0症和疼痛。
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