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液相色谱的分离过程

同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。

开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，A、B和C，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。分配系数小的组分A不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。分配系数大的组分C在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。组分B的分配系数介于A，C之间，第二个流出色谱柱。若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离之目的。

不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。

其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。所以分离效果则是热力学与动力学两方面的综合效益。

色谱柱的技术都有哪些？比如，封尾等，这些技术在应用时都体现在哪里？

色谱柱技术包括填料技术，封尾技术和装柱技术等，填料技术自不待言，填料的差异对色谱柱分离性能和选择性有决定性影响，色谱填料的键合相密度的不同也会影响到填料表面硅羟基外露的多少，进而影响填料的选择性。封尾技术中用到的封尾试剂的差异也会对色谱柱的性质产生很大的影响，如体现在色谱填料的pH耐受范围，水相耐受范围，极性强弱等。装柱技术也没有想象中的这么简单，不同固定相、不同粒径、不同柱管内径和长度，装柱工艺都有所不同，要装出紧密、稳定、均一的柱床，更多是一门艺术，需要经验积累。

液相色谱仪用于食品安全的优点

从食品安全检测的角度来看，液相色谱仪具有适用范围广、分离高、速度快、流动相可选择范围广的特点，在具体的检测活动中液相色谱仪基本能够适应当前食品安全检测的全部内容，同时因为检测过程中采取的分离和液相处理技术都是在现代生物学和网络信息技术的支持下实现的，所以绝大部分检测工作并不需要过多的预处理和处理步骤，检测过程整体表现为快、准、稳，能够准确地提供检测结果。在挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的检测中尤其有利。