高架十字迷宫行为学检测:
实验步骤
1、实验之前,一定要确保高架十字迷宫整个装置的清洁。这个步骤不仅仅是要求当天的实验,更加侧重于每一次动物实验完成后的清洁除味工作,一定要去除上一只动物在宫体内遗留下来的尿液、粪便等,尽可能创造一个清洁、无味道的理想试验环境。同时,实验员需要记录动物的编号、日期、状态等信息;实验动物提前运送到行为学实验室临时笼架 ,
适应环境至少3
动物细胞模型
高架十字迷宫行为学检测:
实验步骤
1、实验之前,一定要确保高架十字迷宫整个装置的清洁。这个步骤不仅仅是要求当天的实验,更加侧重于每一次动物实验完成后的清洁除味工作,一定要去除上一只动物在宫体内遗留下来的尿液、粪便等,尽可能创造一个清洁、无味道的理想试验环境。同时,实验员需要记录动物的编号、日期、状态等信息;实验动物提前运送到行为学实验室临时笼架 ,
适应环境至少3H左右, 减少动物紧张。
2、将实验动物(大鼠或者小鼠)从饲养笼中取出,实验动物尽量背向实验员,将动物轻轻放在仪器宫体的区域,动物面向开臂,然后实验员迅速安静的离开;
3、打开SuperMaze或者VisuTrack动物行为分析软件,跟踪动物在高架十字迷宫仪器内的轨迹运动,自动计算指标,通常实验时长为5min;
4、实验结束后,取出实验动物,放入饲养笼,做好实验完成动物的标记信息,同时,用酒精和纸巾清洁迷宫。

三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)四、实验方法及应用
1) 动物适应实验环境1周后,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宫各臂及区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。
3) 第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。
4) 第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。
5) 第五天,将食物放在食盒内,重复天的训练,2次。
6) 第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。
难点与关键点
将灌注针插入主动脉内是灌注固定的关键,也是难点。首先准确找到主动脉,这是此步骤的要点。可用温生理盐水将胸腔内的血液冲洗干净,用镊子轻轻夹住心 外膜(夹的越少越好,以免影响取材)将心脏向左上方提起,即可看清主动脉,又可使灌注针很容易地插入主动脉内。插入时动作要慢,针尖方向不要偏向右侧,以 免刺入右心房,如果感到有阻力,则将针退后、调整方向重新进针,直到进入主动脉,灌注针进入主动脉后可在心脏的上方看到其位置,灌注针进入主动脉的长度 好为 3~5 毫米,然后用丝线扎紧。切勿将灌注针放在左心室内,这样由于主动脉瓣的关闭,灌注液很难进入主动脉,而是沿着心室的切口流出,致使灌注失败。另 外,灌注针插入成功后,一定要用剪刀剪开右心耳而不是右心室,这是灌流液的出口。剪开心尖的位置一定要掌握好,不能偏右使灌注针插入右心室。

(作者: 来源:)