选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液)选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液),每个稀释度接种3管MUGal肉汤管,每管接种1mL(如接种量超过1mL,则用双料MUGal肉汤管),同时另取2支MUGal肉汤管(或双料MUGal肉汤管)加入与样品稀释液等量的上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)作空白对照。将接种后的培养管置干37+1℃培养箱培养18
环境中新型冠状病毒检测
选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液)
选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液(液体样品可以选择原液),每个稀释度接种3管MUGal肉汤管,每管接种1mL(如接种量超过1mL,则用双料MUGal肉汤管),同时另取2支MUGal肉汤管(或双料MUGal肉汤管)加入与样品稀释液等量的上述无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)作空白对照。将接种后的培养管置干37+1℃培养箱培养18h-24h。将培养管置干暗处,用波长366nm的紫外光灯照射,如显蓝色荧光,为大肠菌群阳性管;如未显蓝色荧光,则为大肠菌群阴性管。培养基检验原理:胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氯钾和磷酸氦二钾是培养基pH缓冲剂:月桂基硫酸钠可以抑制革兰氏阳性菌的生长;大肠菌群可产生一半乳糖苷酶,分解液体培养基中的酶底物4-伞形酮-B-D-半乳糖苷MUGal,使4-伞形酮游离,在波长366nm紫外灯照射下呈现蓝色荧光。
大肠菌群平板计数法操作
典型菌落呈现紫红色,并且菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径为 不小于0.5mm。证实试验为:从VRBA平板上挑取10 个不同类型的典型和菌落,分别移种到BGLB肉汤管内,(36℃±1)℃培养24~48h,观察产气情况。凡是BGLB肉汤管产气,就可以报告是大肠菌群阳性。证实是大肠菌群阳性的试管比例乘以以上步骤中计数的平板菌落数总数,再乘以稀释倍数,就是每g(mL)样品中大肠菌群数。
大肠菌群平板计数法操作起来比较简便,带有菌落的平板可以直接计数,还可以观察菌落特征,可见的菌落与大肠菌群量可以直接对应,便于得出定量结果,这种方法的缺点是因为大肠菌群在平板上很小,所以肉眼有时难以观察,需要用放大镜仔细辨认。验证实验需要挑选菌落,因此受人主观的影响很大,如果没有挑对或挑取的数量不够多都可能导致假阴性结果[3]。

大肠大肠菌群测试片(FilmplateTME
大肠(Escherichia coli)和大肠菌群(Coliform)都是存在于温血动物肠道和粪便的细菌,是条件性致病菌,主要造成水体污染,也可能引起食物中du的发生。大肠大肠菌群测试片(FilmplateTM E.coli&coliform count plate BE203)是一种预先制备好的一次性培养基产品,可以同时检测大肠和大肠菌群,含有大肠菌选择性培养基、冷水可溶性的吸水凝胶和半乳糖苷酶(GAL)和葡萄糖醛酸酶(GUD)指示剂。大肠显蓝色,其他大肠菌群显红色,蓝点加上红点为总的大肠菌群数。 本产品适合于食品及原料中大肠菌群的计数,如消毒牛乳、冷饮和调味品等样品的检测,也可用于表面的卫生检测。
水中粪大肠菌群检测标准方法
目前,大肠菌群检测方法发展很快,已提高到分子生物学水平,使检测更、准确。酶底物法以其操作简便、检测周期短,将取代多管发酵法、滤膜法等传统方法,尤其是酶底物法采用密封培养技术,在检测医院污水时可以减少人员接触而降低检测人员的致病风险,因此具有更强的实用价值和应用价值,正是目前水中粪大肠菌群的检测标准方法之一。

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