随后基于这些结果，研究了TK反应的可逆性（模拟逆偶环缩合），用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮（方案 B）。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中，磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性（表），根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKe
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随后基于这些结果，研究了TK反应的可逆性（模拟逆偶环缩合），用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮（方案 B）。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中，磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性（表），根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKec和来自的TK (TKban) 等微生物TK的D结构具有很强的蛋白质序列同源性。稳定TK 底物的关键残基是相同的，并且与ThDP具有相似的方向。
由于TKgst D结构未知，所以以TKban的X射线晶体结构为模板构建了包含其磷酸化受体醛糖 d-erythrose--phosphate (EP)的TKgst活性位点袋模型，该模型与相同微生物物种的具有高同一性。为提高TKgst对(S)-,-二羟基酮-的裂解活性，分别针对残基Leu、Leu、Phe和Asp进行了研究。对这些位置的SSM表明，DI、LF、FI和LI是为底物结合提供疏水环境的突变体（表）。为了确定提高TKgst活性以裂解脂肪族-或 -羟基酮或的合理位置，基于先前发现的位置来增加TKgst活性以形成相同的以酸类似物作为供体，脂肪醛作为受体的脂肪族α-羟基酮。
但是，还没有方法可以能够方便的、可预测的方式来合成含有多个立体中心的所有立体异构体。上海交通大学张万斌课题组长期致力于协同催化体系的开发并将该策略用于不对称烯丙基取代反应中。近几年该团队成功开发了一个金属钯、小分子催化剂和具有氢键作用的醇溶剂的协同催化反应体系（Chem. Soc. Rev., , , -；Chem. Rec., , , DOI: .tcr.）。
相比于有机催化，金属催化的种类较多；（）两种手性金属催化剂任意组合为一个更加丰富的双金属催化剂库，有利于目标反应的优化。该团队将其成功用于未保护羟基酮的立体发散性的烯丙基化反应中，具有很好的产率，优越的立体和非对映选择性。值得注意的是，使用同样的原料在相同的反应条件下通过简单改变催化剂的组合，可以很方便的合成四种立体异构体。该研究工作得到了自然科学委和上海市科委等的资助。
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