随后基于这些结果,研究了TK反应的可逆性(模拟逆偶环缩合),用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮(方案 B)。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性(表),根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKe
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随后基于这些结果,研究了TK反应的可逆性(模拟逆偶环缩合),用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮(方案 B)。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性(表),根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKec和来自的TK (TKban) 等微生物TK的D结构具有很强的蛋白质序列同源性。稳定TK 底物的关键残基是相同的,并且与ThDP具有相似的方向。
α-羟基酮(也称为酰基甘油)是天然产物和分子中普遍存在的结构模块,它们也是高转化和应用反应中常用的合成前体(图a)。传统的缩合方法通过醛的缩合反应,或者酮的α-羟基化和烯烃的酮羟基化在内的其他氧化反应,都能合成α-羟基酮骨架的化合物,但是在底物多样性和选择性方面都会受到限制。因此,从容易获得的起始原料设计反应得到这类似有的化合物骨架,是很重要的一个合成方向。
图(a) SSBC-+-酚、-酚+NaBH和SSBC-+-酚+NaBH存在形成的DMPO-H的EPR光谱;(b)SSBC-电极和裸电极的I-t曲线。为了进一步说明SSBC NaBH-酚体系中可能的反应过程,以DMPO为剂进行了EPR光谱分析,证明了H自由基的存在。如图(a)所示,-酚与SSBC-混合溶液中无信号。当加入NaBH后,检测到一个明显的由::的::三联体(aH=. G, an =. G)组成的信号,该信号被认为是DMPO-H加合物。

研究认为,活性H来源于B-H键的解离,SSBC加速了H的提取。这与计时安培试验的结果一致[图(b)]。图(a)反应速率常数Kapp与石墨N含量的关系;(b)反应速率常数Kapp与IDIG值的关系。图(a)显示出反应速率常数Kapp与石墨氮含量的关系,可以观察到石墨氮和Kapp含量之间的近正线性关系。还发现-还原的催化活性与石墨氮的含量之间存在较高的相关性。证明石墨氮在硝基芳烯中表现出的吸附能和长的N-O键,这可能是其比掺杂石墨烯中其他氮活性更高的原因。

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