Elisa试剂盒操作步骤
1.用盖片镊Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将Elisa试
玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒厂家
Elisa试剂盒操作步骤
1.用盖片镊Elisa试剂盒将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将Elisa试剂盒培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行固定以及细胞化学检测。
Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2)
1 洗涤不充分,洗后未拍干,样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制;充分洗涤,静置15秒,拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用,不要反复使用,否则易造成污染。
2 底物污染,未避光保存,出现颜色 弃去底物,重新配置
3 样品稀释液污染 弃去稀释液,重新配置
4 吸头重复使用,未洗净或消毒不 吸头尽可能一次性使用
5 不正确的孵育时间,温度(尤其是底物孵育的时间) 常用的温育温度有37℃和室温,其次是43℃和2~8℃。完全按照说明书要求。
6 偶联抗体(streptavidin-HRP)浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度
7 ELISA板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃;使用结合力低点的Elisa板
8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血严重 建议使用非溶血或轻微溶血样本,严重溶血样本会导致背景偏高。
样品或标准品OD超出正常范围
1 错误的样品或标准品的稀释 完全按照说明书稀释
2 偶联抗体浓度过高 按照说明书调整到的浓度
3 TMB底物孵育时间过长 调整到合适的孵育时间
4 样品或标准品污染 避免污染
5 错误的孵育时间或温度
(作者: 来源:)