随后基于这些结果,研究了TK反应的可逆性(模拟逆偶环缩合),用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮(方案 B)。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性(表),根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKe
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随后基于这些结果,研究了TK反应的可逆性(模拟逆偶环缩合),用于用适当的 TKgst 变体裂解脂肪族 α-羟基酮(方案 B)。构建TKgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (C-C)和酮糖 (C-C) 分别是TK的受体和供体底物。为了提高TKgst对非磷酸化α-羟基酮- 的活性(表),根据通过位点饱和诱变 (SSM) 进行的半合理诱变在目标位置修改了TKgst活性位点。TKsce、TKec和来自的TK (TKban) 等微生物TK的D结构具有很强的蛋白质序列同源性。稳定TK 底物的关键残基是相同的,并且与ThDP具有相似的方向。
在剧烈的条件下,产物a也未能产生二醇(eq. );并且在另一种对映体配体的条件下,也未发生该转化(eq. )。两种催化剂对映体的手性袋与羟基酮似乎并不相容。当用NaBH还原a时,仅定量得到手性反式二醇;而将保护羟基后,在相同条件下用NaBH还原该酮仅得到顺式二醇(eq. )。其合理的解释可能是形成硼酸酯后进行分子内氢迁移,这可能是硼酸酯发生酯交换的结果。 (图片来源:Chem. Sci.)

近年来,该团队在胺脱氢酶催化合成手性胺的研究中已经取得了一系列研究成果,如通过分子改造显著拓展了胺脱氢酶催化的底物范围(ACS Catal. , , );利用自主开发的胺脱氢酶设计了合成手性胺的多酶级联反应新途径(J. Org. Chem. , , ; ChemCatChem , , )。上述工作由陈飞飞博士在三位的共同指导下完成,并得到自然科学和留学等项目的资助。

此外,该缺陷是氢分子的活性吸附位点。图(b)显示出SSBC-中的IDIG比SSBC-高,表明SSBC-的较低规律水平和缺陷密度,这也可能有助于其更高的催化活性(a)-、(b)-、(c),-;(d) SSBC-还原硝基酚ln (CtC)随时间的变化曲线。为了探索SSBC-催化剂的通用性,对其他硝基酚进行了催化加氢。从图(a-c)可以看出,所有硝基酚都得到了有效的转化。随着反应的进行,-(nm)、-(nm)、,-(nm)的吸收波长处均有下降,出现了属于反应产物的新峰。所有反应混合物的颜色终变成无色,表明已完全氢化还原。

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