RPA 的用途
以此为基础的TwistAmp⑧核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。
立博泰业——多年供应TwistDx试剂盒 ,我们公司坚持用户为上帝,想用户之所想,急用户之所急,以诚为本,讲求信誉,以产品求发展,以质量求生存,我们热诚地欢迎各位同仁合作共创辉
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恒温扩增技术
应用领域:广泛应用于临床诊断,食品安全检测,动物疾病检测等领域
技术特点:,特异,无需专门设备
类型:取代PCR的恒温核酸扩增技术,目前有应用前景的就是RPA技术,此外也有一些其他恒温扩增技术,主要包括:
1. 滚环核酸扩增( rolling circle amolification,RCA )
2.环介导等温扩增( loop-mediated isothermal amplification,LAMP)
3.链替代扩增
4.依赖核酸序列扩增( nucleicacid sequence based amplification ,NASBA)
5.解链酶扩增( helix dependent amplification, HAD)
PCR操作方法
这个方法很主流,也很经典。但是这个操作步骤太多,而且每次都是微量,手一抖就完蛋了。另外引物(就是拉链扣)的质量也是关键,如果错了拉链,那么整个检测前功尽弃。
当然还有机器清洗的问题,如果上一个阳性样本检测之后,没有洗干净设备,下一个本来阴性患者可能就会假阳性被误诊。大医院自己都有PCR检测仪器和人员,流程比较熟练。美国欧洲很多医院偏专科,综合性超大型少一些,本来很多检验都是委托外包第三方实验室。遇到疫情,着急出结果自己上手,可能有手法不纯熟的情况。如果又正好使用了某些的无证试剂盒厂商出品的无证试剂,多重误差叠加,准确度就会崩盘。
RPA技术
01 特别快,传统PCR要45分钟,因为要反复升温降温。RPA由于是恒温,所以只需要3-10分钟。
02 灵敏度高,因为是高度定向扩增,所以样品即便有点儿杂质也OK,免除了前处理环节,尽量多的保留了样本。
03 温度控制要求低,一般是加热到40℃,但是在紧急情况下,贴在人身上用人体的体温36℃、37℃也没问题。甚至在室温25℃,也是可以运行,就是慢点儿,要等一个小时而已。
04 适用性强,面对RNA病毒,直接在试剂里加入逆转录酶就好,一锅端。
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