冷冻过程中的降温是技术的难点,因为在0℃至-80℃的温度下,的形态和功能会遭到损害,甚至导致的。为了减少和避免降温过程对的损伤,必须让度过这一阶段,为此不仅要考虑降温的速率,还要考虑在结冰时产热的影响,所以用到倍玛特程序降温仪(冷冻仪)这一设备。终冷冻的将储存于-196℃的液氮罐中。 合肥倍玛特仪器设备有限公司欢迎您的咨询!
生物样本大都对温度极
程序降温仪厂家
冷冻过程中的降温是技术的难点,因为在0℃至-80℃的温度下,的形态和功能会遭到损害,甚至导致的。为了减少和避免降温过程对的损伤,必须让度过这一阶段,为此不仅要考虑降温的速率,还要考虑在结冰时产热的影响,所以用到倍玛特程序降温仪(冷冻仪)这一设备。终冷冻的将储存于-196℃的液氮罐中。 合肥倍玛特仪器设备有限公司欢迎您的咨询!
生物样本大都对温度极其敏感,尤其是细胞样本、制品。随着细胞的发展,细胞冷冻技术及效果变得更加重要。现在也有一些冷冻降温是通过高溶度的冻存保护剂保障活率,大剂量的冻存保护剂往往对细胞、回输受体有害,如何安全有效的提高细胞及制剂的冷冻效果,是一个重要步骤。生物样品的成功冻存不仅取决于合适的冷冻保护剂,更取决于冷冻的速率、的温度控制和合理的温度梯度(40℃~80℃)。
在细胞冻存的过程中,样本内水分会从液相转变为固相,水分也随之散失,导致细胞内盐、代谢物浓度改变,进而造成渗透压失衡,直接影响冻存细胞的复苏。同时冷冻的速率太快或者太慢,容易导致细胞内水分丧失或形成大冰晶,都不利于细胞存活。另外,生物样本内水分的相变过程也伴随着潜热释放的现象,在从液相转变为固相时会释放出大量热量,使样本温度瞬速上升。
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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