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样品如果溶解度太低如何上制备HPLC？
（1）了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质，通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。
（2）样品可能某种晶型难溶，这样可以加入其他溶剂以助溶。
（3）不是一定要用流动相来溶解样品，对溶解度差的样品，可以选择甲醇，THF或DMSO等溶解样品。特别是
工业制备色谱费用
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视频作者：北京通恒科技有限公司
样品如果溶解度太低如何上制备HPLC？
（1）了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质，通过调节溶剂的pH值等,以达到较好的溶解度。
（2）样品可能某种晶型难溶，这样可以加入其他溶剂以助溶。
（3）不是一定要用流动相来溶解样品，对溶解度差的样品，可以选择甲醇，THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO，对一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留，不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱，一般不会影响峰型。
（4）可以固体上样。
多肽的分离制备,如何上量？如何增大分离度
反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。
关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6mm内径）上做一下实验,找到很大的分离度,这一过程的难度是很大的,要不断地改变流动相和固定相,然后再线性或非线性放大到制备,放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。
还可以考虑离子交换来分l离。
制备色谱柱如何测柱效？
可以选择几种物质，苯，萘、蒽等的衍生物上柱，流动相一般用65-80%的甲醇/水，测定后根据保留时间计算塔板数。由于制备色谱的管路死体积一般比较大，很难得到和供应商相同的柱效。建议在制备柱开始使用时在自己的色谱上测一下柱效，然后定期检测柱效进行以进行比较。
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疏水色谱填料
在传统固定相长链根部嵌入特殊基团，该“极性嵌入基团”能够和硅胶表面的硅羟基或流动相中的水形成氢键，对硅胶基质形成一种保护作用，且减少碱性化合物与硅羟基的作用，保证了碱性化合物的良好分离，对具有复杂结构的碱性化合物表现出不同于传统反相色谱的分离性能，即不需要“使用 pH>7 的流动相来抑制碱性物质的解离”的方式就可以对碱性物质实现良好的色谱保留；
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