苏0木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏0木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏0木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 用于细胞学染色和免0疫组化(IHC)复染。
本试剂盒不提供的试剂
1. 一抗
2.
染色液
苏0木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏0木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏0木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 用于细胞学染色和免0疫组化(IHC)复染。
本试剂盒不提供的试剂
1. 一抗
2. 洗涤液
3. 过氧化物酶底物
4. 去离子水或蒸馏水
5. 内源性过氧化物酶抑制0剂
6. 封固剂
7. 其它:显微镜、玻片、盖玻片、加样器、试管、湿盒
溶液配制
1. 1×洗涤缓冲液:将 10× 洗涤缓冲液用蒸馏水进行 10 倍稀释(例如 5 ml 浓缩洗液 + 45
ml 蒸馏水)
2. 0.3% H2O2 无水甲0醇: 加 0.3% H2O2 无水甲0醇于组织切片上,室温孵育 30min, 在洗
涤缓冲液中润洗 10~15min。
过度染色
1. 没有有效封闭内源性过氧化物酶。
2. 不完全脱蜡。
3. 过度组织粘附。
4. 一抗稀释度不当。
5. 蛋白质非特异性结合。
不染色
1. 忘记加一抗、生物素化二抗或亲合素-HRP。
2. 处理过程中抗原破坏。
3. 固定不当。
4. 用含叠氮钠洗涤液。
5. 操作过程中样品彻0底干燥。
6. 未按操作程序操作。
染色较弱
1. 加免0疫试剂前没有将洗涤液去掉。
2. 抗0体稀释不当。
3. 显色前底物放置时间过长。
4. 过氧0化氢的破坏作用。
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