低温生物知多少?
实验室的传代保藏过程
1. 按说明书要求复溶菌粉,转种于适当的增菌培养基内(G1),复壮后转接至平板上,并于适当温度下培养适当时间,分离出单个纯种菌落,此为第2代(G2)。
2. 鉴定完成后,挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,同时挑取纯菌落转接斜面作为工作用。此时,保藏为第2代,但工作用则为第三代。
3. 将第2代管冷冻保存
厌氧低温生物菌种厂家
低温生物知多少?
实验室的传代保藏过程
1. 按说明书要求复溶菌粉,转种于适当的增菌培养基内(G1),复壮后转接至平板上,并于适当温度下培养适当时间,分离出单个纯种菌落,此为第2代(G2)。
2. 鉴定完成后,挑取纯菌落制成浓菌悬液用于制备甘油冷冻管,同时挑取纯菌落转接斜面作为工作用。此时,保藏为第2代,但工作用则为第三代。
3. 将第2代管冷冻保存,将工作用于适当温度下培养适当时间后可用于试验。
4. 取一支冷冻保存的G2代转种于平板和斜面培养基上,平板上的制成冷冻保藏管第三代(G3),斜面培养基经适当温度下培养适当时间后用作工作用(W3)。
5. 将第三代(G3)冷冻或低温保存,将生长、转种后的G2经灭菌处理后丢弃。
6. 当工作用代数小于5时,可直接用上一代工作用转接下一代工作用,如W3可直接转接为W4。
7. 按上述程序操作,直至G4转为W5为止,需重新开启安瓿,再重复上述操作程序、保藏和使用。
以上方法中,被分为两类。传代用和工作用,传代用用于甘油冷冻管法保藏,工作用用斜面低温保藏法保藏。
实验证明,甘油冷冻管的有效期至少为2年,但其主要适用于细菌(需氧)、酵母菌的传代、保藏、真菌和芽孢类细菌则需应用其它方法。
低温生物菌种的工艺介绍
现有生化工艺有活性污泥法、生物接触氧化、MBBR、MBR等,这些工艺在常温下均可实现氨氮的有效去除并达标,这时好氧系统中占主导地位的是中温(微生物)硝化菌,硝化菌分自养硝化细菌和异样硝化菌。
自养硝化菌生长繁殖缓慢,在活性污泥系统中无法与异养细菌竞争,难以维持较高的细胞浓度,需要保持较长的污泥停留时间来取得较好的脱氮效果,易受外界环境影响,对环境冲击尤其是毒物冲击非常敏感,硝化系统很容易崩溃,要经常不断的驯化和培养。
低温生物的复壮措施
① 纯种分离。采用平板划线分离法、稀释平板法或涂布法均可。把仍保持原有典型优良性状的单细胞分离出来,经扩大培养恢复原菌株的典型优良性状,若能进行性能测定则更好。还可用显微镜操纵器将生长良好的单细胞或单孢子分离出来,经培养恢复原菌株性状。
② 通过寄主体内生长进行复壮(如Bacillus thuringiensis的复壮)。主要是对一些寄生性的菌株,可以将衰的菌株接种到相应的宿主体内,提高其寄生性能及其它性能。
③ 淘汰已衰的个体(采用比较激烈的理化条件进行处理,以杀生命力较差的已衰个体)。可以采用各种外界不良理化条件,使发生衰的个体死去,从而留下群体中生长健壮的个体.如:对'5406'抗生菌的分生孢子进行-30-10度的低温处理5-7天,使80%死去,在抗低温个体中可找到健壮的个体.
④ 采用有效的保藏方法。
低温生物菌种的菌剂用法
微生物菌剂用量少,主要起调节作用。微生物菌剂的使用原则是“早,近,匀”使用时间早,离作物根系近,施用均匀。
⑴ 喷施 液体微生物菌剂含有固氮菌,光合细菌等微生物,可以用作叶面喷施,给植物增加营养,促进光合作用。我们公司的微生物菌剂不适合作叶面喷施,因为主要成分是多种芽孢菌复合而成的。
⑵ 拌种 将种子放入清水中浸湿后捞出控干,随后将本品扬撒在种子上、混拌均匀,阴干后播种。使用种衣剂的种子应拌种衣剂,后拌本品,阴干后播种,随拌随播。这种方法适合各种粮食种子。能促进种子生长,减少病虫害。
⑶ 浸种 菌剂:水以1:2的比例混合,搅拌后把种子放入菌液中,搅拌浸泡8—12小时,捞出阴干后播种。提高种子发芽率,增强抗病能力。
⑷ 蘸根 对于移栽作物,将本品兑适量水,蘸根后移栽即可。适用于有根的作物,在移栽时使用比较好。
⑸ 拌根 微生物菌剂可以和农家有机肥混合,有机肥必须先充分腐熟后才能使用,否则会杀掉菌剂中的微生物。当作种肥或底肥时,可将本品与化肥或有机肥拌在一起,随肥料一起施用,须随拌随用,以免造成肥料融化而影响播肥质量。
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