应用领域CRF-1应用广泛,可用于冷冻管、细管、样品袋、微孔板和矩阵96孔板中的多种样品的冷冻保存: 胚胎研究 研究 临床和研究样本,例如常规冷冻管中的淋巴细胞和组织细胞 各种哺乳动物细胞,包括心肌细胞,脂肪和肌肉 脐带血 微孔板中的贴壁细胞和 细胞悬浮液按编号/条形码分类和储存 机器人集成 – CRF-1也已成功集成到机器人系统中 人的和兽医的IVF(试管受
全自动程序降温仪
应用领域CRF-1应用广泛,可用于冷冻管、细管、样品袋、微孔板和矩阵96孔板中的多种样品的冷冻保存: 胚胎研究 研究 临床和研究样本,例如常规冷冻管中的淋巴细胞和组织细胞 各种哺乳动物细胞,包括心肌细胞,脂肪和肌肉 脐带血 微孔板中的贴壁细胞和 细胞悬浮液按编号/条形码分类和储存 机器人集成 – CRF-1也已成功集成到机器人系统中 人的和兽医的IVF(试管受精)。
低温休眠技术代表着我们对未来无线的遐想,包括延长寿命、星际旅行,等。早在1972年就成立了Alcor会,该会在1976年进行了首例人体冷冻术,该机构为早成立的人体冷冻组织机构。目前,已为100多人进行冷冻术。美国《财富》杂志称,Alcor的客户包括很多亿万富翁,他们向会捐赠大量资金,资助其研究人体冷冻技术。但就现实层面而言,目前低温生物学的发展还难以达到想科幻电影中的那样完整个体的保存,更多的还是单体的细胞层面,比如胚胎、、哺乳动物细胞、、、组织切片和啮齿动物等。
冷冻保护剂又是什么呢?它主要用于在低温保存生物样品过程中降低细胞的冷损伤。目前,常用的冷冻保护剂主要分为渗透性的低温保护剂和非渗透性的低温保护剂2大类。渗透性的低温保护剂是指在低温保护剂添加到细胞悬浮液后,可以渗透到细胞膜内部的来置换出细胞的水分。渗透性低温保护剂主要有甘油、DMSO、丙二醇、乙二醇等。非渗透性低温保护剂是指不能渗透到细胞膜内部。常见的非渗透性低温保护剂有海藻糖、葡聚糖等。此外近年来,也经常使用抗冻蛋白作为新型的低温保护剂。
步骤:(1)冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。(2)配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、,逐滴加入二亚砜 (DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。(3)离心收集培养之细胞,用加的培养基重悬起细胞,取少量细胞悬浮液(约0. 1 ml)计数细胞浓度及冻前存活率。(4)取与细胞悬液等量的冻存液,缓慢逐滴加入细胞悬液,并晃动试管,制成细胞冻存悬液(DMSOzui后浓度为5~10%),使细胞浓度为1~5×106cells/ ml,混合均匀,分装于已标示完全之冷冻保存管中,1~2 ml/vial,并取少量细胞悬浮液作污染检测。严密封口后,注明细胞名称、代数、日期。然后进行冻存。
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