ELISA试剂盒的操作方法——间接法
以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容，北京中检维康生物技术有限公司供应ELISA试剂盒，欢迎新老客户莅临。
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗
酶联ELISA试剂盒厂家
ELISA试剂盒的操作方法——间接法
以下是北京中检维康生物技术有限公司为您一起分享的内容，北京中检维康生物技术有限公司供应ELISA试剂盒，欢迎新老客户莅临。
1.用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜；
2.次日洗涤3次；
3.加一定稀释的待检样品（未知）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤；
4.（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二（抗）0.1ml；
5.37℃孵育35-60分钟，洗涤；
6.然后用DDW洗涤。
其余步骤同“双夹心法”的4、5、6。
ELISA试剂盒的分类
检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。
试剂盒的标准曲线高点OD 值均在2.0±0.2，零孔的OD 值都控制在0.10以下。
试剂盒的标准曲线相关系数R≥0.98。
试剂盒重复性好，板内、板间变异系数均<9 %。
试剂的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成试剂量不足的情况。
检测抗体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30), 方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。
Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2）
1 洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留 洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。
2 底物污染，未避光保存，出现颜色 弃去底物，重新配置
3 样品稀释液污染 弃去稀释液，重新配置
4 吸头重复使用，未洗净或消毒不 吸头尽可能一次性使用
5 不正确的孵育时间，温度（尤其是底物孵育的时间） 常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。完全按照说明书要求。
6 偶联抗体（streptavidin-HRP）浓度过高 按照说明书调整到合适的浓度
7 ELISA板子不正确的贮存 酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的Elisa板
8 没有正确封闭 在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间
9 样本溶血严重 建议使用非溶血或轻微溶血样本，严重溶血样本会导致背景偏高。
（作者： 来源：）
