重组酶介导等温核酸扩增技术原理
RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行核酸扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA,在与引物同源的序列处使双链DNA解旋,单链结合蛋白(SSB)防止单链DN
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重组酶介导等温核酸扩增技术原理
RAA技术 是重组酶介导等温核酸扩增技术(Recombinase Aided Amplification)的简称,是一种利用重组酶、单链结合蛋白、DNA聚合酶在等温条件下(佳温度37℃)进行核酸扩增的技术。具体原理为:重组酶、单链结合蛋白、引物形成复合体扫描双链DNA,在与引物同源的序列处使双链DNA解旋,单链结合蛋白(SSB)防止单链DNA复性,在能量和dNTP存在的情况下,由DNA聚合酶完成链的延伸,5-20分钟就可实现仪器扩增。
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DNA检测的原理是聚合酶链式反应(PCR)。如果你了病毒,那么应该能检测到病毒的核酸,我们可以利用体外DNA扩增的方式扩增这些核酸并检测。PCR就是一种体外DNA扩增的技术,简单来说就是可以让特定的DNA分子一条链变两条链,两条变四条,四条变八条,每个循环翻一倍。然后通过看经过多少个循环这个DNA分子的数量超过阈值,就可以计算原本样品中DNA的量(也就是说每少一个循环超过阈值说明病毒核酸的量多一倍)。一个30循环的PCR反应大概需要两小时。算上样品处理等时间应该会在四到五个小时左右,如果要等其他人一起做则更久。
自 1983 年出现经典聚合酶链反应 (PCR) 方法以来,核酸扩增已渗透到生命科学的各个领域。 然而,尽管具有基本的影响,但 PCR 已被限制在实验室的范围内,因为它需要一套复杂的热循环系统,其限制了在资源匮乏环境中的外部应用。新的等温扩增策略正在寻求通过在恒温下提供核酸来突破传统的实验室限制。在这些方法中,重组酶聚合酶扩增 (RPA) 是发展快的方法之一,尽管它的开始相对较晚,但是却经历了的普及和市场化。
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