试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张 catalog No.30101
该微孔板将特异性识别小鼠IgG 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6 mL catalog No. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗cAMP的小鼠单
Mouse cGMP kit
试剂盒组成材料和试剂
1. 羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张 catalog No.30101
该微孔板将特异性识别小鼠IgG 的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。
2. cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6 mL catalog No. 30102
本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。
3. 抗cAMP的小鼠单克l隆抗l体工作液6 mL catalog No. 26002-2
本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。
注意:为了稳定和长效的实验,抗l体储存于-80℃。在使用前将6μL 1000×偶联酶储存液加入到6 mL 稀释缓冲液中配制为工作液,并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。
4. 中和液6 mL catalog No. 30103
5. 10×浓缩洗涤液15 mL catalog No. 30103
含去污剂的磷酸盐缓冲液。
6. cAMP标准品0.25 mL catalog No. 30203
浓度5000 pmol/ mL
7. 显色底物A,12 mL catalog No. 30107
8. 显色底物B, 12 mL。 catalog No. 30108
9. 终止液,6 mL; catalog No. 30110
注意:该溶液有腐蚀性;储存时请旋紧瓶盖

线性关系
cAMP浓度为16.0pmol/mL的样品,用0.1M HCl进行连续七次1:2梯度稀释。将实际的cAMP浓度和测定的cAMP浓度绘制图表。该直线的斜率为1.000,相关系数为0.999。
交叉反应
部分相关化合物的交叉反应由竞争ELISA测定。将可能的交叉反应物溶解到试剂盒分析缓冲液中,浓度从500pmol/mL至500,000pmol/mL。这些样品通过乙酰化在cAMP竞争分析中被测定,通过比较样品中交叉试剂的实际浓度,可以计算出交叉反应,并用百分比(%)表示。

酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。
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