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博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
水佐剂是一种用于制备小鼠单克0隆抗0体和多克0隆抗0体的免0疫佐剂,与常规使用的弗氏佐剂相比,具有免0疫针次少、抗原用量低、抗0体产生快、抗0体滴度高、抗0体亲合力高、不破坏抗原天然构象和使用方便等优点。
水佐剂使用重要提示
1、水佐剂只需两针免0疫,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,与弗氏佐剂相比可至少减少两针次免0疫。
2、水佐剂通过减少免0疫针次和降低每针次抗原用量,从而可大大节省总抗原用量。推荐使用的抗原用量为
(1)免0疫原性较弱的亚单位蛋白每针次1~50μg(通常为10~20μg);
(2)免0疫原性较强的灭活全病毒和病毒样颗粒每针次0.1~10μg(通常为1~2μg)。
3、水佐剂抗0体产生快,抗0体滴度高,抗0体亲合力高,无论是用于单克0隆还是多克0隆抗0体制备,只需要在三周内进行两针免0疫,通常在第五周即可获得ELISA滴度高1:10000~1:10000000的高亲合力抗0体水平。
博奥龙公司主要产品有抗0体制备全套产品、病毒包装相关产品、2万多种科研用抗原抗0体、1200多种二抗,涵盖20多个物种和HRP、Biotin、FITC、AU、PE、Dylight、Alexa Fluor、Cy3、Cy5、 AMCA、TRITC、Texa Red等标记二抗;品类的内参标签抗0体;另有WB、IHC、ELISA、细胞培养相关试剂及诸多特色产品和特色技术服务。
取血:
免0疫一周后,可以耳动脉取血检测抗0体效价。因为起初几次免0疫产生的抗0体的效价比较低,头两次取血,够检测用即可。在三次免0疫后,可以获得较高0效价的抗0体,每次取血量可以在40ml,不要取太多,否则会造成兔子贫0血。
前几次取血用19号针头对兔子进行耳动脉取血,室温过夜析出血0清。
zui后一次取血可以采用颈动脉放血,具体操作如下:
1、家兔仰卧于兔架上固定头部,用纱布固定四肢。头部略放低以暴露颈部。剃毛并消毒皮肤。
2、沿颈部中线用手术刀切开皮肤约10cm,分离皮下结缔组织,直至暴露出气管两侧的胸锁乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血钳止血)。
3、用直头止血钳分离胸锁乳突肌与气管间的颈三角区疏松组织,暴露出颈总动脉后用弯头眼0科镊使之游离,剥离神经和结缔组织。
4、于动脉下套入两根黑丝线,分别置于远心及近心端。结扎远心端的丝线。近心端的动脉用血管夹夹住。
5、用小拇指垫在血管下,用尖头眼0科手术剪在两根丝线间的动脉璧上剪一小口(勿剪断),插入塑料放血管。再将近心端的丝线结扎固定于放血管上,以防放血管滑脱。
6、松开止血钳,使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。
人出生前,体内已经有分化成熟的B细胞并分布在血液和淋巴中。B细胞成熟的标志是:它们的细胞膜上有了球蛋白样结构形式的特异性抗原受体。出生后,在中以每天100万个的速率产生B细胞。在抗0体方面,新生儿不能产生抗0体,其血浆中的IgG是胎儿时期由母体经转运到胎儿血循环中的;出生3个月后,在外周血中开始能检测出他自身产生的抗0体;1岁时,血液中IgM含量可达到成人的水平;6~7岁时,IgG和IgA也达到了成人的水平。
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