ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，
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ELISA试剂盒的测定原理
测定技术的基础在于抗原之间的特异结合反应，所以任何的诊断剂离不开好的原料，如抗原，酶等。以前用于测定的抗原通常为各种纯化抗原，而则为纯化抗原动物后获得的多和使用杂交瘤技术得到的，而抗原或的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来，随着分子生物学的发展，使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或及其酶结合物等测定试剂几成为现实的新一代试剂，各种新型使用的测定方法也不断出现。
ELISA试剂盒的用途
ELISA的基础是抗原或的固相化及抗原或的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或仍保持其活性，酶标记的抗原或既保留其活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的或抗原）与固相载体表面的抗原或起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原，也可用于测定。
然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。
ELISA试剂盒——ELISA实验通用规则
1、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
2、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加。倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
3、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
4、底物是光敏感的，要在临用前现配。
5、检测前，要打开酶标，使之稳定10分钟以上。
6、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
7、待检样品要澄清，否则会影响结果。
8、温浴时间应遵守试剂盒规定。
9、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。
10、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。
Elisa试剂盒——Elisa实验常见问题及解决方案
现白板，阳性对照不显色
1 显色液变质 更换新的显色液
2 洗涤液配制有误 请按说明书所示稀释倍数配制
3 未加酶结合物而认为已加入 注意不要漏加
4 终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用 每次加液前均应看清标签
5 标准品稀释方法错误/或标准品有问题 请按照说明书所示配置说明书，注意单位和稀释倍数
6 不同试剂盒或不同批号的试剂混用 建议使用同批次试剂盒。不能混用不同试剂盒或不同批号的试剂。
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